杉木纤维素合成酶基因CesA的克隆及表达分析.pdfVIP

浙 江 农 林 大 学 学 报 ， 2015， 32 （1）： 40 - 46 Journal of Zhejiang A ＆ F University doi:10.11833/j.issn.2095-0756.2015.01.006 杉木纤维素合成酶基因CesA 的克隆及表达分析 庞 景， 童再康， 黄华宏， 林二培， 刘琼瑶 （浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地， 浙江临安 311300 ） 摘要： 通过 逆 转录聚合酶链式反 应 （RT-PCR ）结合 cDNA 末端快速 扩增 （RACE ）技术 ， 从 杉木 Cunninghamia lanceolata 中克隆 到 2 个全 长 为 3 235 bp 和 3 876 bp 的纤维 素 合 成 酶 基 因 cDNA 序 列 ， 被 分 别 命 名 为 ClCesA1 和 ClCesA2 ， GenBank 登 录号 分别 为 JQ844574 和 JQ844575 。 相 应编码蛋白 分别 包含 992 和 1 092 个氨基 酸残 基 ， 推 测 分子 量为 111 845.3 D 和 123 105.7 D ， 等 电点为 6.04 和 6.65 。 氨基 酸序列分析发 现 ， 它们具有植 物纤维素合成 酶基因 相 应 的 结 构特征——— 锌指 结 构 ， 2 个 易变 区 CSRI 和 CSRII ， 2 个保守 区 CRI 和 CRII ， 纤维素合成 酶底 物结合结 构 域 “D, D, D, QVLRW”， 以及 8 个跨膜 区。 荧光 定 量 PCR 分析表明 ： ClCesA1 和 ClCesA2 基因 在 茎 中表 达 丰 度 均为最高 ， 且成 熟木质部 中表 达量均高于 皮层 中的相 应数值 ； 2 个基因在根 和针 叶 中的表 达量相 对较低 。 以具特 殊材质性 状 的 矮 生杉木和 正 常杉木木质部 为材料 的进一步表 达 分析发现 ： ClCesA1 和 ClCesA2 在 正 常杉木木质部 中的表 达 量 大约 是矮 生杉木表 达量 的 2～12 倍 。 2 个杉木 CesA 基因 可能在杉木木材形 成过程 中具有 重要作 用 。 图 5 参 19 关键词： 林木 育种学 ； 杉木 ； CesA 基因 ； 基因 克隆 ； 序列分析 ； 表 达分析 中图分类号： ； 文献标志码： 文章编号： （ ） S722.3 Q943 A 2095-0756 2015 01-0040-07 Isolation and expression analysis of cellulose synthase genes in Chinese fir （Cunninghamia lanceolata ） PANG Jing, TONG Zaikang, HUANG Huahong, LIN Erpei, LIU Qiongyao （ ’ The Nurturing Station for the State Key Laboratory of Subtropical Silviculture, Zhejiang A F University, Lin an 311300, Zhejiang, China ） Abstract: In this study, two full-length cDNAs encoding cellulose synthase （CESA ） were is