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分子生物学进展主要授课内容及思考题 专题一: 细胞周期及其调控 问答题:Cyclin,CDK及CKI在细胞周期进程中是如何发挥作用的? 专题二: 细胞凋亡 问答题:试述细胞凋亡的分子机制 专题三: 癌及抗癌 问答题:试述原癌基因活化机制及抗癌基因的作用 参考书:来茂德主编,《医学分子生物学》，人民卫生出版社1999（卫生部规划教材，研究生教材） 专题四《糖生物学》 概述：研究历史 研究内容及发展 与医学的关系 复合糖类： 蛋白聚糖： 组成与结构 生理功能 病理时的变化 2．糖蛋白： 组成 糖链与蛋白的连接方式 糖化过程及特点 生物功能 研究寡糖链的常用方法 与疾病的联系 糖生物学 (Glycobiology) 糖复合物glycoconjugate—糖类与蛋白或脂类形成共价结合物。 一 研究历史 50~60年代以前，其研究仅限于（寡多）糖的化学组成和一般结构测定，基本属于有机化学范畴。 70年代后，研究逐渐活跃，至80年代中、后期到90年代初，飞速发展，发现糖类在生物体中不仅是能源及结构成份，而且担负极为重要的生物学功能。 现认为，糖复合物中的糖链是生命科学中肽链、核苷酸链之外具有重大生物意义的第三链，其研究已成为继蛋白、核酸之后探索生命奥秘的第三里程碑。 具有相同残基数的寡糖与肽和寡核苷酸相比更为复杂，包含有更多信息（例如：4肽有数十种异构体，4糖基理论上有三万种异构体）。越多的事实证明，糖复合物中的寡糖是体内重要的信息分子，在分子识别中起举足轻重的作用， 形成一新兴学科。 二． 研究内容 1 结构：无模板合成使研究进展落后，近年来，测定技术飞速发展，HPLC、荧光标记、CE等，提高分辨率、灵敏度。 2 酶：内、外切糖苷酶，糖基转移酶可研究各糖基功能。→改造，“糖工程学”应运而生，糖蛋白药物。 3 代谢：糖复合物合成步骤基本弄清，各种酶在细胞内定位也大致了解。目前，糖基转移酶的调控研究正在兴起。 4 凝集素：一类能识别糖链结构的蛋白（非酶及Ab），为工具， 在研究上各学科相互渗透：物理、化学、生化、药理、分子生物学 ?????? 三 与医学关系 1 “细胞颜面 ”，糖被、植被，传递信息、受体，每个红细胞表面50万个糖蛋白、表面唾液酸（负电），避免在血管内粘付。 2 （1900，Landsteiner发现血型，?世界大战抢救伤员，获1901年诺贝尔奖） 各型的抗原决定簇差异为糖链非还原末端糖基，A—N-乙酰氨基半乳糖，B—半乳糖，O—无此末端糖基。 3 糖链改变，可产生自身抗体，→ 自身免疫性疾病。85年发现类风湿病人IgG糖链半乳糖少于正常。 4 恶性肿瘤的恶性行为（侵袭、转移等）与其细胞表面糖复合物的组成、结构密切相关。 5 病原微生物的感染有种属与组织专一性，取决于微生物表面的凝集素对细胞表面不同糖链的识别。 6 神经系统富含脂类，糖脂为重要成分，如Alzheimer病脑灰质或白质中神经节苷脂明显减少。 四． 研究进展 糖生物学是生物化学与生物医学交叉点的前沿。 美国：86年，能源部成立复合糖类研究中心。糖工程会议?2年。 日本：89年，创立杂志?糖科学与糖工程动态?；91年，投资百亿日元实施“糖工程前沿计划”。 欧洲：94-98年，有“欧洲糖类研究开发网络计划”。 我国此方面研究起步较晚，但发展迅速，队伍日益扩大，国防交流不断加强。 复 合 糖 类 复合糖类：（1） 蛋白多糖：含糖多 （2） 糖蛋白：含蛋白多 （3） 糖脂 蛋白聚糖 (proteoglycan，PG) 以糖为主，糖可占90-98%。糖胺多糖（glycosaminoglycan, GAG，以前也称粘多糖）为二糖单位，重复连接组成的无分支多糖链，二糖中必有一种为氨基糖（氨基葡萄糖或氨基半乳糖：乙酰化），另一种为糖醛酸（葡萄糖醛酸或艾杜糖醛酸）。糖胺多糖多含有硫酸。 已知有六种糖胺多糖： 透明质酸(hyaluronic acid,HA) 硫酸软骨素(chontroitin sulfate,CS) 硫酸皮肤素(dermatin sulfate,DS) 硫酸角质素(keratan sulfate,KS) 硫酸乙酰肝素(heparan sulfate,HS) 肝素(heparan,Hep) 蛋白聚糖的结构 GAG： （1）HA：葡萄糖醛酸+乙酰氨基葡萄糖(GlcUA-GlcNAc) 结构最简单的 GAG，|β1→3| β-1，4 不含硫酸，HA分子量大，可达1000万（2万5千个重复二糖）。生理溶液中，为多聚阴离子，(--COOH),分子相当刚硬，呈无规扭曲团状。分子间可交织形成网络。一些蛋白可以特异地非共价作用