皮肤特异表达cMyc转基因小鼠的建立与分析.pdfVIP

农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2008,16 (1): 37~40  ·研究论文 · 转基 因小鼠构建的改良方法 *  1.2 ,  2 ,  2 ,  2 ,  2 ,  2 *  任红艳  张兴举  杨述林  崔文涛  唐 中林  李 奎  (1.华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室， 武汉 430070;  2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基因与细胞工程研究室 ， 北京 100094） CMV­PAAV 14 在 摘要：以 载体为基础载体， 以皮肤特异人 （人角蛋 白 ） 基 因启动子替换原质粒中 的 启动子后 ， 其多克隆位点区插入 鼠 基因的 cDNA 序列和 编码序列 ， 构建成高效表达 基因的真核表达载体。通过双原核 显微注射技术， 将线性化 的载体 DNA 注入到 C57BL6 近交系小 鼠(  )受精卵 的 2个原核 中， 将注射后状态 良好 的 ， 共移植 了 ， ， 最终获得 。通过 胚胎移植到代孕鼠的输卵管中 200枚受精卵 6 只受体怀孕 44 只成年小鼠 PCR 和 Southernblot分 ,2 4% Southernblot , 析证明 只为阳性转基因小鼠， 转基因阳性率为 。 结果分析显示 外源片段是以多拷贝串联重复的形式整合到 鼠染色体中。 ： ； 关键词 人角蛋白 ；转基 因小鼠 基因； 皮肤特异表达 中图分类号: S188  文献标识码: A  文章编号: 1006­1304(2008)01­0037­04  Establishment andAnalysisofTransgenic Micewith  Gene SpeciallyExpressedinthe Skin  1,2  2  2  2  2  2  RENHong­yan  ,ZHANGXing­ju ,YANG Shu­lin ,CUIWen­tao ,TANGZhong­lin ,LIKui *  Recombinant expressionvectorwhich efficientlyexpressed  genewasmade frompCMV­MCSplasmidbackbone  by inserting a human kertain 14 promoter to replace the  promoter, and the  gene cDNA sequence and  gene coding  sequence were inserted