鸡Lpin1基因不同剪接体的鉴定和表达特性研究.pdfVIP

·扬州· 第十六次全国动物遗传育种学术讨论会论文集 ·505· 鸡Lpinl基因不同剪接体的鉴定及表达特性研究 李素雅1，黄艳群，，陈文2，张彩霞2，张建宏2，张淑平2· 引育 Lpinl基因具有磷脂酸磷酸化酶的活性．该酶处于动物脂肪形成过程中的限速步骤．它催化磷脂酸形成甘油二 酯，对甘油三酯的形成起关键作用，与动物脂肪形成密切相关。目前，国内外已经从小鼠、人类等动物中获得了该基 因的eDNA片段或全长序列，鉴定了该基因的不同剪接体，并对该基因及其不同剪接体的表达情况做了研究。但有 关该基因在鸡上的报道还很少，本实验拟通过对鸡印讯J基因的克隆鉴定该基因在鸡上的不同剪接体，并对其表 达情况做研究。 材料与方法 以河南地方土杂鸡(黑羽5只)和土鸡与肉鸡杂交种(麻羽5只)共10个个体为样品，其中麻羽鸡平均体重比 黑羽鸡重0．75kg。获取每只鸡的心、肝、肺、脾、肾、脑、胰腺、肌胃、卵巢、小肠、皮肤、皮下脂肪、腹部脂肪、胸部肌肉、 Lpinl基因拼接序列设计引物．以黑羽鸡2号心脏、肌胃eDNA混合样为模板，PCR扩增产物通过回收进行克隆测 序，并根据测序结果设计Lpinl基因及其剪接体的特异性引物，以黑羽鸡各组织eDNA为模板做半定量，以lO只鸡 各组织cDNA样为模板做荧光定量，检测却inl基因在不同品种鸡、不同组织的表达情况。 结果 通过克隆测序得到了鸡印inl基因的三种不同剪接形式，和人、鼠的不同剪接形式比对后分别命名为Lpinl— a，Lpinl-a，Lpinl-7，其中Lpinl-a编码区全长2 在胰腺中表达量最低。在卵巢中表达量最高；印inl-a在胰腺中表达量最低，在胸肌、鼹肌、卵巢中表达量都较高。荧 光定量结果也表明总印inl，Lpinl川在胰腺中表达量最低，在卵巢中表达量最高；却inl邛在胰腺中表达量最低， 在胸肌、腿肌中表达量较高。Lpinl基因及其剪接体在黑羽鸡与麻羽鸡各组织表达量都不存在显著差异。 讨论与结论 Lpinl基因是影响动物脂肪沉积的主要候选基因。本实验结果说明鸡印讯J基因与人、鼠印讥，基因相似，存在 不同剪接形式。总印fnJ基因，印inl--a基因在鸡卵巢中表达量最高，这可能与卵巢中卵黄的生成有关，因卵黄中胆 固醇含量较丰富，故印inl的表达量也相对其他组织较高。鸡Lpinl--13不仅在卵巢中表达量较高，并且在肌肉组织 中也有较高的表达量。Lpinl基因及其不同剪接体的表达特性可能说明它们在脂肪形成过程中具有不同机制，有待 进一步研究。另外Lpinl基因及其剪接体在两种鸡各组织表达量都不存在显著差异，可能与我们所选的个体有关， 有待于进一步扩大群体再验证。 关键词：鸡；Lpinl基因；剪接体；荧光定量 伍建设工程科技创新团队(096SYJHl6092)等项目资助。 ·通讯作者。E-mail：huangyq@yahoo．corn．cno