Ser-CD手性色谱柱的装填和拆分性能研究.pdfVIP

P16-130 Ser-CD手性色谱柱的装填及拆分性能研究 李琰庞宇罗爱芹+ 北京理工大学生命科学与技术学院，100081，bitluo@bit．edu．cn 关键词：湿法装柱，丝氨酸衍生环糊精，手性拆分 药物对映体的分析已成为当今药学领域的研究热点。利用手性固定相法拆分药物对映体因其简 便、实用性广泛及立体选择性好等优点，已得到快速发展，成为当今高效液相色谱手性分离的最主 要手段之一【11。 本文选择了本实验室合成的I}-CD及其丝氨酸衍生物手性固定相作为研究对象，对此类手性固 定相高效液相色谱柱的装填，柱效的测定等方面进行了深入的研究，为本实验室日后自行装柱积累 了经验。利用丝氨酸衍生环糊精手性固定相装填的色谱柱，在反相体系下对几组位置异构体及手性 药物进行了拆分研究，探讨了分离作用机理。 一、手性色谱柱的装填 在湿法装填技术中，装柱压力对柱效的影响十分突出，选择合适的装柱压力才能达到理想的效 果【2l。实验中采用本实验室自主合成的丝氨酸衍生环糊精(Ser-CD)手性固定相，在不同装柱压力 苯色谱峰进行计算，结果列于表I。 表I色谱柱的测定结果 由实验结果可以得知，随着装柱压力的逐渐加大，色谱柱装填越紧实。柱效越高，当装柱压力 为6000psi以上时柱效虽仍然增加，但增幅较小。实验中采用的SPB．3全自动空气动力源稳定输出 压力为0．5kg／cm2，而且装柱压力过大对装柱机不利，为获得高柱效同时延长装柱机使用寿命，认为长 装填的色谱柱满足条件． 二、Ser-CD手性固定相拆分性能研究 酚和硝基苯酚三组位置异构体以及a．苯基甘氨酸、尼莫地平和l-苯基·1·丙醇等几组手性药物的拆分 性能。在流动相为甲醇／水=l／l，流速为0．5mL／min色谱条件下，三组位置异构体均得到了很好的分 离。通过调节流动相组成，手性药物拆分效果较好。其拆分色谱图见图I．表2为三组手性药物的 ‘ 色谱分离结果。 通过实验发现，Ser-CD键合硅胶手性固定相对位置异构体有很好的分离效果。总体而言，氨基 苯酚的疏水性小于硝基苯胺，因此环糊精对它们的包结能力较弱，其保留值明显小于后者。0．氨基 苯酚的保留值大于m．氨基苯酚和p．氨基苯酚，可能是由于o．氨基苯酚易形成分子内氢键，使分子的 -43- 疏水性增加，有利于增强环糊精空腔对其的包结能力。 表2手性药物的色谱分离结果 保留时间 容量因子 “分离因子 分离度 化合物编号 tl t2 kl k2 a R 注； 1．尼莫地平；2．Ⅱ．苯基甘氨酸；3．1．苯基1．丙醇 对、问，邻混氨基苯酚 对、问混苯二酚 邻、对混硝基苯胺 尼莫地平对映体 ：部j “苯基甘氨酸对映体j一 1一苯基l·丙醇对映体 实验中发现，经丝氨酸改性过的环糊精对含有苯环且具有易形成氢键基团的化合物具有很好的 分离能力，其分离度都在1．3以上。可能是由于Ser-CD上的丝氨酸羟基与该类化合物形成氢键，增 强了其在固定相上保留行为。 参考文献： 【l】谷焕鹏，胡升芳．高明堂．手性固定相在高效液相色谱中的应用研究进展．中国药房．2005，16(18)： 1421-1422 【21黄晓笛，邵朋，张越清．高效液相色谱柱的湿法装填技术．化学工程师【J】．1996，54：51-52 [3】刘国诠，余兆楼编著．色谱柱技术(M】．北京：化学工业出版社，2005：96 ．44．