TNF-α对猪脂肪细胞脂肪分解和其相关基因转录表达的影响.pdfVIP

细胞工程与转基因 TNF一0【对猪脂肪细胞脂肪分解及其相关基因转录表达的影响 郑雪莉，李玉成，鞠大鹏，杨公社+ 西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，陕西杨凌712100 关键词：TNF一∞猪；脂肪细胞；脂肪分解；基因表达 引言 necrosisfactor 肿瘤坏死因子a(Tumor a，TNF—a)是脂肪细胞中最早发现的分泌产物之一，它对脂肪细胞 可产生多种效应，如促进凋亡、抑制前体脂肪细胞分化和削弱胰岛素信号，不仅如此，TNF—a还可作为一个 脂解作用的强启动剂，缓慢而强烈地刺激肥胖个体脂肪细胞甘油三酯水解，产生过量游离脂肪酸，进而抑制 葡萄糖的利用，最终引起胰岛素抵抗和糖尿病的发生。猪是最接近人类的模式动物，是研究人类肥胖和代谢 疾病的理想动物模型。研究证实，许多脂解激动剂都能作用于猪脂肪组织，刺激其发挥脂解作用，但TNF-0t 对猪脂肪组织的脂解作用目前尚不清楚。本研究以脂解作为切入点，以猪原代脂肪细胞作为研究材料，通过 研究TNF-a对猪原代脂肪细胞脂肪分解的作用及其对脂解相关基因转录表达的调控，探讨其在猪脂肪分解中 的调控作用，有助于理解猪肉质的形成机理，为防治人类相关疾病提供理论依据。 材料与方法 3 根据本实验室建立的方法分离培养猪原代脂肪细胞，诱导分化后(充脂率芝85％)，用1、10、100 ng／mLl h，及10 h。使 种剂量TNF—a作用体外培养的猪原代脂肪细胞24 ng／mL耵师．a处理脂肪细胞1、6、12、24、48 和脂滴包被蛋I兰tperilipinA表达量变化。 结果 组甘油释放量比对照组增加近1倍。与对照组相比，10 TNF．n处理1h后甘油释放量即显著增加(P ng／mL 0．05)，6 h后甘油释放最增加近1倍。研究结果证实，随TNF-Q浓度与 h甘油释放量增加极显著(P0．01)，24 A AmRNA表达量下调程度不同。 TGH一2、HSL、LPL、MGL和perilipinmRNA表达量，脂肪分解酶及perilipin 讨论与结论 脂肪细胞的脂解过程主要是在脂肪分解酶的作用下甘油三酯逐级降解，最终分解为甘油和游离脂肪酸。 特异性地将甘油一酯水解为甘油和FFA，完成甘油三酯的水解。LPL主要功能是降解循环中的甘油三酯。 A在脂肪分解调控中可能起到“分子开关”的作 A是定位于脂肪细胞脂滴表面的磷酸化蛋白。Pefilipin Perilipin 用，基础状态下作为屏障覆盖在脂滴的表面，保护甘油三酯免受水解；刺激状态下，被PKA磷酸化后，协同 HSL和ATGL促进脂解。本研究结果表明TNF．0L以时间和剂量依赖的方式促进了猪脂肪细胞的脂解作用，这一 mRNA表达的下调有着密切的关系，不依赖于对脂肪分解酶的表达调控。 脂解过程与Perilipin 致谢 本研究受国家重点基础发展计划(973计划)(2004CBll7506)资助。 宰通讯作者：gsyan9999@hotmail．com 一245—