NADPH氧化酶参与兔晶状体上皮细胞中超氧阴离子的生成.pdfVIP

维普资讯 NADPH氧化酶参与兔晶状体上皮细胞 中 超氧阴离子的生成 TheRoleofNADPH OxidaseinSuperoxideAnion Generation inRabbitLensEpithelialCells# 屈思萌 安 莹 宋旭东 张 伟 MarjorieLou 1首都医科大学附属北京 同仁医院眼科中心，北京市眼科研究所 ，北京 100730 2内布拉斯加大学林肯分校，林肯NE68583—0905 SimengQu，YingAn，XudongSong，WeiZhang ，MarjorieLou BeijingInstituteofOphthalmology，BeijingTongrenEyeCenter，CapitalMedicalUniversity Bering100730，China 2UniversityofNebraska—Lincoln，Lincoln，NE68583一D905，USA 目的：观察兔晶状体上皮细胞内是否存在内源性超氧阴离子生成机制。 方法：用不同浓度的花生四烯酸作用于兔晶状体上皮细胞N／N1003A，利用化学发光检测仪测定 超氧阴离子的浓度变化，观察超氧阴离子歧化酶 (Superoxideaniondismutase，SOD)和NADPH氧 化酶抑制剂DPI对超氧阴离子的影响；用RT—PCR方法检测 NADPH氧化酶(NADPHoxidase)亚 单位NOX家族在N／N1003A细胞中的表达。 结果：花生四烯酸可以刺激兔晶状体上皮细胞 N／N1003A迅速生成超氧阴离子，该活性氧能被 SOD有效清除，黄素蛋白抑制剂 DPI能显著抑制 N／N1003A细胞生成超氧阴离子。RT—PCR结 果表明，NOX蛋白的5种 同源异构体 [包括 NOX1、NOX2(gp91phox)、NOX3、NOX4、NOX5]的 mRNA在兔晶状体上皮细胞中都有表达。 结论 ：NADPH氧化酶参与兔晶状体上皮细胞中超氧阴离子的产生，NOX蛋白5种同源异构体的 mRNA都在 N／N1003A细胞中表达。聪 学报2007；23 199—2 ． 关键词：晶状体；超氧阴离子；NADPH氧化酶 Purpose：Toidentifythepresenceofendogenoussuperoxideanion—generatingsystem in rabbitlensepithelialcells． M ethods：The generation of superoxide anion was quantified by using lucigenin— amplyfiedchemiluminescence (LUCL) in intactrabbitlensepithelialcells (N／N 1003A)．TheLUCLreadingswererecordedwithaluminometer(LumiStarBMG) immediatelyupon arachidonicacid fAA)addition．Totesttheeffectsofsuperoxide dismutase(SOD)andDPI(non—specificinhibitortoNADPH oxidase)，cellswere Dreincubatedfor30minuteswithindicatedconcentrationsofinhibitorsbeforestimulation withAA．TheexpressionofNOX family，includingNOX1，NOX2 orgp91phox NOX3，