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维普资讯 第 27卷 第 6期 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 Vo1．27 No．6 2007年 12月 JournalofCentralSouthUniversityofForestryTechnology Dec．2007 文章编号 ：1673～923X(2007)06—0163—03 PAGE银染和条带回收方法的改进 陈亮明，张冬林 ，李志辉 ，陈永华，肖晶晶，彭丽梅 (中南林业科技大学 资源与环境学院，湖南 长沙 410004) 摘 要： 为了提高聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)的银染效果和条带回收的效率，以广玉兰DNA为材料进行 ISSR—PCR分析，比较 了两种银染(常规银染法和快速银染法)和条带 回收法(乙醇糖原法和改进的煮沸法)．结果显示 ：两种银染方法效果一致 ，但常规银染 要用 2～3h，而快速银染仅用 30min，是常规银染的 l／6～1／4；改 良的煮沸法 回收条带 比乙醇糖原法更简便 、更快捷．因此 ，快速银染 和改 良的煮沸法条带回收法可 以应用在 以后的研究中． 关键词 ： 聚丙烯酰胺凝胶电泳；银染；回收；广玉兰 中图分类号 ： Q5o3 文献标志码 ： A Improvementon PAGE SilverStainingandBandRecovering CHEN Liang—ming。ZHANGDong—lin。LIZhi～hui，CHEN Yong—hua，XIAOJing—jing，PENG Ii—mei (School0fRes0urcesandEnvironment，CentralSouthUniversity0fForestryandTechnology，Changsha410004，Hunan，China) Abstract：To enhancetheefficiency ofsilverstainingandbandrecovering inPolyacrylamideGelElectrophoresis (PAGE)，both conventionalsilverstainingandspeedysilverstainingwereinvestigated，using thetechniqueofISSR—PCR markerswith Magnolia grandifloraDNA．Duringband—recovering．conventionalethanolhepatinmethodandimprovedboilingmethodwereemployedand foilowedbvreamplificationofPCR identification．Theresultsindicatethatthetwomethodsproducesimilarclearbandsand band patterns．buttheprocedureofconventionalsilverstainingtakes2～ 3hourswhilethespeedysilverstainingonlyrequires30minutes which reducestheexperimentaltimeby 4～ 6times． Theimprovedboiling method ismoreconvenientand time—saving thanthe conventionalone．Speedysilverstainingandimprovedboilingband—recoveringcanbeemployedinthefuturestudies． Keywords：Po／yacrylamideGelE／ectrophoresis(PAGE)；sil、，erstaining；recovering；Magnoliagrand／flora 目前大部分实验室在检测