胶束电动力学毛细管色谱中峰定性行为研究.pdfVIP

CE-022 胶束电动力学毛细管色谱中峰的定性行为研究 郑育芳 ‘刘大渔’熊建辉 ‘张普敦1张 朝’许国旺” (1.中国科学院大连化学物理研究所 国家色谱研究分析中心.大连116011) (2.大连医科大学病理系，大连 116011) 胶束电动毛细管色谱(MEW 是目前研究较多、应用较广泛的一种毛细管电泳模式。应用MEKC 不仅能分离离子化合物，还能分离不带电荷的中性化合物。该体系中其中一相是带电的离子胶束， 较难用质谱进行定性分析。峰的识别通常要用标样，将未知峰的迁移时间与标样的迁移时间相对 照或向样品中加入标样的办法来完成。在实际毛细管电泳分离过程中，由于有效电场强度的变化 和毛细管壁表面的不稳定常常会引起电渗流速率的变化，导致分析实际样品时迁移时间重复性的 不足。它影响了对分析物定性和定量的精确度，影响了毛细管电泳在实际样品中的应用。目前在 MEKC体系下，从理论上探讨提高分析物定性可靠性的工作还不多。曾有文献报道在毛细管区带电 泳 (CZE)和MEKC中应用两个标记物技术对化合物定性的重复性进行验证。本研究的目的在于采 用相对淌度、迁移指数等多种定性参数对在MEKC体系下尿中核昔采用MEKC分离的定性行为进行 研究，试图实现对其中13种核普组分的可靠识别。 1实验部分 尿中核普用苯基硼酸亲和凝胶色谱法预处理，然后用BeckmanMDQ毛细管电泳系统分析。 2 结果与讨论 尿中核昔的分离情况见图10 训 I2 16 0 0 5 0 0 6 甘 二 门 4 0 0 6l1l0 0 0 2 3,is1ul1111111111}U;,T11} ” 0 一 12 22 32 公 t(时动 图2尿中核普的电泳谱图 2.1绝对迁移时间、容f因子 (k)和有效淌度对峰定性的比较一’ 有文献报道采用容量因子(k)来定性。然而，溶渍迁移时间微小的变化将导k(k值较大的 差异。并且当胶束的速度很小或SDS浓度很高时，t.。就无法测定，使得k无法求得。这些因素都 使得k植用于定性受到限制。 联‘系人 许国旺，大连市中山路161号1116011 本文系国家自然科学基金资助项目 资〔助号 淌度也可用于定性。溶质的有效电泳淌度 (Ftef)可表示为 Ll} Ll, (1) “‘一“ap一“。一可 Vto 式中乙、1。分别为毛细管总长度和毛细管进样端到检测器的长度，41。为电渗流淌度，V为分离电 压。 由于在测定尿中核普组分的体系中采用的SDS浓度为300mmol/L，胶束的迁移时间极其缓慢， 使得t.。无法获得。此时通过公式 I〔)计算x:来定性占有着极大的优势。我们着重考察了不同毛 细管柱、日内和日间分离不同尿样的核若组分，对该体系峰的定性行为的影响。 2.2 有效淌度与相对有效淌度对峰定性的比较 有效淌度这一概念的提出，在一定程度上提高了对分析物的定性可靠性。然而其相对标准偏 差都在3%以上，仍然无法做到可靠识别。为此我们提出了相对有效淌度的概念。选用了出峰位置 居中，无千扰峰的1一甲基次黄嘿吟核普 (MID 的有效淌度作为参比，获得其它核普组分的相对有 效淌度。结果表明:采用相对有效淌度对尿中核昔进行定性比用有效淌度要优越得多。 2.3 两个标记物技术的应用 气相色谱中保留指数的概念已经被广泛地用于未知峰的定性。与其类似的两个标记物技术己