RP-HPLC法测定山楂根中有效成分Ha含量方法学研究.pdfVIP

全国生物医药色谱学术交流会(2008)论文集 D12RP．HPLC法测定山楂根中有效成分Ha含量的 方法学研究 李健禹玉洪戴荣继邓玉林车 北京理工大学生命科学与技术学院北京，100081 北京理工亘元医药技术开发中心有限公司 国内近年来对山楂果、叶进行了化学成分、药理作用和临床等方面的研究，取得了可喜 的进展，但对其根部研究较少。 《中华本草》记载，山楂根具有“消积和冒、祛风、止血、消 肿，主治食积、反胃、痢疾、风湿痹痛等”的功效。药理研究证实从山楂根中分离得到的化合 物Ha对SSAO酶有很强的抑制作用，提示它可能对糖尿病、心血管疾病具有预防和治疗作用。 采用RP．HPLC法测定了山楂根药材中Ha的含量，为建立山楂根药材质量标准提供检测方法， 以便药材的进一步开发与利用。 关键词：山楂根，Ha，高效液相色谱法 1实验部分 1．1仪器与试剂 LC—Solution色谱数据工作站；甲醇，乙腈均为色谱纯，水为自制超纯水。 1．2对照品溶液的制备 取自制的对照品Ha(面积归一化法的含量98％)，用甲醇配制成0．1mg／ml的溶液，摇匀。 1．3供试品溶液的制备 取山楂根粉末19，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密．塞，称定重量，超声处理30 分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 1。4线性范围测定 分别精密量取对照品溶液0．5，1．0，1．5，2．0，2．5，3．0，3．5，4．0ml于10ml容量瓶中， 加甲醇定容至刻度，用0．459in微孔滤膜滤过，取续滤液209l进行液相色谱分析，记录色谱图。 1．5色谱条件 色谱柱：KromasilC18反相硅胶键合色蘑柱；流动相：乙腈：水=58：42等度洗脱：流速为 lml／min：检测波长为254nm。 2结果与讨论 一 2．1系统适应性实验结果 对照品和供试品的HPLC图谱分别见图1～图2，结果供试品溶液的对照品色谱峰与相邻 色谱峰可达基线分离，分离度大于1．5，理论塔板数为9651，拖尾因子1．02。 图1。Ha的RP-HPLC图 图2．山楂根药材的RP—HPLC图 全国生物医药色谱学术交流会(2008)论文集 2．2线性范围测定结果 Ha在5～40岭mld范围内，浓度与峰面积线性关系良好。 ．2．3含量测定结果 用外标法计算得到的药材中Ha的含量为0．027％。 2．4方法学验证 ‘ (1)精密度实验 精密吸取同一供试品溶液重复进样6次，每次20111，以Ha的峰面积计，RSD=I．8％，仪 器精密度良好。 表1山楂根药材含量测定精密发实验结果 (2)重复性实验 取同一批号样品6份，分别按照供试品溶液配制项下操作测定，以Ha的峰面积计， RSD=1．4％，操作重现性良好。 表2山楂根药材含量测定重复性实验结果 (3)稳定性实验 供试品溶液在制成后的0，2，4，6，8，12，16，24h测定，以Ha的峰面积计，RSD=I．9％， 样品的稳定性良好。 表3山楂根药材含量测定稳定性实验结果 3 结论 应用RP-HPLC法方法测定山楂根中Ha的含量i该方法简便易行，快速准确，结果可靠， 可以作为山楂根有效成分含量的检测方法。 参考文献 【1】胡熙明．中华本-草IM]．4版．上海：上海科学技术出版社，1999． 184