鸭CYP19A1基因mRNA组织表达特性的研究.pdfVIP

鸭C印7鲥J基因mRNA组织表达特性研究 田晓东，徐日福。，车永顺，包艳波，秦宁，王志贤，杨雨江，姜建萍 (吉林农业大学动物科技学院分子生物学与动物遗传育种实验室，长春130118) 引言 P450，P450 细胞色素P450芳香化酶(aromatasecytochrome arom)，又称做Cytochrome 是雌激素合成的关键酶之一。主要存在于中枢神经系统、胎盘、卵巢组织中，也存在于脂肪、 睾丸和。肾上腺)。目前对于此酶的研究主要集中在人、大鼠、小鼠上，在这些动物的、胎盘、 卵巢组织和睾丸的间质细胞、支持细胞和生精细胞中都有芳香化酶表达。现有研究表明， P450arom mRNA的表达与卵泡的发育有关，此酶生成减少或酶活性受到抑制都将直接影响 雄烯二酮和睾酮转化为雌酮和雌二醇，从而引起卵巢及血清雄激素升高以及排卵障碍。禽类 生长、发育、性成熟和生殖过程具有重要调控功能，尤其在刺激母禽的卵泡发育、成熟直至 排卵中均发挥着促进作用。但关于CYPl9A1基因在家鸭组织中表达和分布的报道较少。 材料方法 分别采集吉林本地麻鸭(公、母各5只)在18周龄时的大脑、卵巢、输卵管、肝脏、 脂肪、睾丸和肾上腺组织，快速收集、并于液氮冷冻保存，同时提取不同组织的总RNA、 GenBank 分别来自同性别和|一组织的各个体样品等量混匀后，反转录合成cDNA。根据NCBI No．NM 中已收录的鸡CYPl9A1基因mRNA序列(Accession001001761)设计一对特异引 mRNA表达水平差异。 结果 结果表明，扩增获得了鸭CYPl9A1基因片段长度为590bp，§．actin基冈扩增片段长度 为461bp。吉林本地麻鸭在18周龄时的大脑、卵巢、输卵管、肝脏、脂肪、睾丸和肾上腺 组织中均有表达。其中，在性腺组织(卵巢、睾丸和肾上腺)中的CYPl9A1mRNA表达水 平较高，其次为输卵管组织，在大脑、肝脏和脂肪组织中的mRNA表达水平相对较低。此 表明，鸭CYPl9A1基因mRNA在体内组织分布较广、表达水平相对较高。 讨论与结论 鸭的繁殖性状是衡量其种用价值和生产性能的重要技术经济指标之一。在人和鼠等的 研究表明，CYPl9A1基因mRNA的表达与卵泡的发育有关，此酶生成减少或酶活性受到抑 制都将直接影响睾酮向雌二醇的转化去路，从而引起卵巢及血清雄激素升高以及排卵障碍。 的活性在颗粒细胞中高，且随卵泡体积(卵泡期的大卵泡直径≥8mm)的增大而增加。在中 等卵泡中的卵泡膜细胞和颗粒细胞中均未见P450arom表达，卵巢间质细胞中亦未发现 P450arom活性。另有研究表明，CYPl9A1mRNA水平与精子的生成和运输有关，而精子 CYPl9A1 mRNA水平与运动能力相关，芳香化酶可能与精子运动能力的获得有关，或许可 以作为精子运动能力的标志物。在家禽方面，刘胜军等(2008)研究认为细胞色素P450芳 香化酶基因影响家禽的精液质量，和精子品质密切相关。这些研究表明CYPl9A1基闪与动 物繁殖功能密切相关，但具体机制机理尚不清楚。目前尚未见关于家鸭CYPl9AI基冈在不 同组织mRNA表达的相关报道。本研究采用半定量RT-PCR方法检测发现，在被检的七个 样品组织中均有较高表达，此同时表明，鸭CYPl9A1基因mRNA表达与卵巢和睾丸的正常 生理功能发挥密切相关。研究鸭CYPl9A1基闪在不同组织不同发育阶段的mRNA时空表达 变化及其相互之闻的关系，对于了解CYPl9A1基因在控制鸭的卵泡发育和精子发生过程中 的作用和调控机制具有重要意义。 和吉林省科技支撑计划重点项目。·通讯作者：E．mail：rufusxu@yahoo．corn．ell。