单细胞分析的研究进展.pdfVIP

第26卷增刊 分析试验室 V01．26．Suppl． 2007年10月 Chinese of 200r7—10 J,,umaJ l_山ratory Analysis 单细胞分析研究进展 李向军，袁倬斌睾 (中国科学院研究生院化学与化学工程学院，北京100049) 作为最小的生命结构单元之一，细胞对于生 漩涡的微流控系统，利用离心力的不同达到分离 物体功能的正常发挥起着重要作用，长久以来， 的目的。 研究工作者一直在寻找新的分析方法和技巧从事 2单细胞分析 细胞簇、单细胞、亚细胞的研究。近年来，在样品 单细胞分析方法包括血细胞计数法、微流控 获取、细胞操纵、细胞内容物的测量及细胞间动 芯片法、毛细管电泳法电化学检测、质谱法、激光 力学过程的方面都取得了很大进展，单细胞分析 诱导荧光检测等。与传统的分析方法相比较，微 已经成为分析化学一个重要的研究内容，除了大 流控法可有效的避免细胞分析过程中的稀释问题。 量的研究报告之外，已经有了自己的专业会议论 坛，如德国Mtinste的单细胞测量会议。 胞，他们采用电穿孔技术溶解细胞，每分钟可分 1细胞的选择与分离 析12个细胞，分析速度远远大于传统的毛细管电 目前，科学研究工作者已经可以采用高度灵 泳法。 敏的方法进行细胞的研究，这些方法包括显微镜 免疫分析由于其独特的高灵敏度、高选择性， 观测、PCR以及微型化学分离系统等，但由于细 已经成为一种通用的分析技术。传统的免疫分析 胞本质的差异性，就使得在对大量细胞进行研究 是比较耗时耗力的，免疫技术与分离手段的联用， 的过程中，产生了一定偏差。为此，需要从一个或 如高效亲和免疫色谱、毛细管电泳酶联免疫技术 者很少一部分细胞出发来获取性质相对一致的细 的出现，则极大的克服了以上缺点。如Sweedler等 胞群，这个过程通常被称为克隆。而在单个细胞 采用免疫与毛细管电泳联用技术，分析了复杂生 的分类和选取中，流式细胞术、柱色谱、磁性分 物样品中L广天冬氨酸的含量，并且将之应用到了 离、有限稀释等技术都被用作从大量混合样品中 单个神经细胞中L天冬氨酸的测定。 获取单一细胞的手段。新的方法包括微流控、双 对于细胞中酶的分析来说，对酶活性的检测 E．Sims等开发设计比对酶含量的检测更能反应细胞的生理状态，对 电泳等技术。最近，Christopher 了一种新的技术，他们将微制作技术与激光显微 单个细胞内酶活性的评价可以提供细胞信号通道、 镜平台集合起来，通过激光在选定的基底表面产 新陈代谢方面的信息。MonicaM．Paleic等采用多 生一个气泡从而使粘附有单个细胞的聚合物小盘 重进样一毛细管电泳荧光检测技术对单个St9细 与玻璃基底分离开来。这种技术目前已处于商业 胞中d一葡萄糖苷酶的活性进行了评价，该技术利 化的早期。 用a一葡萄糖苷酶对以1c的催化作用，通过检测 通过减小分离通道的尺寸适应单细胞的大小， aGlc的反应产物Dg，达到了评价酶活性的目的。 许多微流控技术已经被应用于细胞分析，单个细 单细胞分析不仅包括细胞内物质的分离分析， 胞可以被固定在某个特定的区域以利于下一步的 也包括对细胞表面结构、功能及其动力学研究。 研究。而Dan