实验室手册【兽医免疫学】.docVIP

实验室手册 ＬＡＢＯＲＴＯＲＹ　　　ＨＡＮＤＢＯＯＫ （兼作研究生兽医免疫学实验技术指导讲义） 焦新安　　　编 江苏农学院传染病教研组 一九九三年三月前言 实验室是进行教学和科学研究的重要基地，为适应教学、科研及实验室建设和管理的迫切需要，笔者根据教研室的教学、科研实践情况，以力求简明和实用为宗旨汇编了这本《实验室手册》，共分四个部分，其中第一、第二部分适于实验室管理和研究生等人员的实验工作基本素质和基本技能的训练；第三部分可用作研究生兽医免疫学实验指导，亦可供有关教学人员参考；第四部分是作为家畜传染病学实验课教师参考教材。整个手册反应了近年来家畜传染病教研室在教学、科研、教书育人方面的最新成果，可供同类生物学实验室交流和参考。 在编写过程中得到刘秀梵教授和张如宽教授的审阅和大力支持，室内其他同志亦提出了许多宝贵意见，特此致谢！由于时间仓促和编写水平有限，经验不足，错误之处诚望读者不吝指正。 编者 １９９０年６月 １９９０年我们试编的《实验室手册》得到了校内外读者的大力支持，并得到了许多宝贵意见，该手册正在补充修改之中，可望近期脱稿。 为了满足研究生兽医免疫学实验技术和部分家畜传染病学实验技术的教学等急需，我们稍作调整后重印部分手册。恳请读者继续提出宝贵意见！ 编者 １９９３年３月 目 录 第一部分 实验室工作手册 第一章 总则 附：实验室一般规则 第二章细则 第一节 无菌室工作须知 第二节 送洗须知 第三节 试剂的保存和使用须知 第四节 菌种、毒种和细胞株保存须知 第五节 超低温冰箱和液氮罐使用须知 第六节 高值仪器使用须知 第七节 常用小型仪器使用须知 第八节 实验记录须知 第九节 值日工作人员的职责须知 第十节 文献资料查阅须知 第十一节 试验准备须知 第十二节 其他注意事项 第二部分　　常用仪器的操作程序及使用注意事项 第一节多功能紫外可见分光光度计 第二节酶联免疫阅读仪 第三节电子天平 第四节各类显微镜及显微摄影技术 第五节核酸蛋白检测仪 第六节各类离心机 第七节酸度计 第八节各类冰箱的使用和保养 第九节电泳装置 第十节空调机、抽湿机、超静工作台 第十一节自动颗粒制冰机 第十二节其他仪器设备 第三部分实验室常规试验程序 第一章 组织培养及常用溶液的配制 第一节鸡成纤维细胞（ＣＥＦ）、鸭成纤维细胞（ＤＥＦ）培养 第二节组织培养溶液配方 第三节配制溶液注意事项 第二章淋巴细胞杂交瘤技术及使用溶液的配制 第一节配合程序 第二节溶液配方 第三节单抗制作技术中的其他方法 第三章组织培养使用物品的准备 第一节一般原则 第二节玻璃器皿的准备 第三节橡皮制或塑料制品的准备 第四节其他用品的准备 第五节纯水制备程序 第六节新生犊牛血清的制备 第四章酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）的程序 第一节间接ＥＬＩＳＡ试验 第二节直接ＥＬＩＳＡ试验 第三节夹心ＥＬＩＳＡ试验 第四节竞争ＥＬＩＳＡ试验 第五节ＤＯＴ－ＥＬＩＳＡ试验 第六节酶标组化法 第七节ＥＬＩＳＡ常用溶液的配方 第八节酶标抗体的制备 第五章免疫荧光试验的程序 第一节脂多糖敏化甲醛化绵羊红细胞的制备 第二节蛋白质敏化ＳＰＢＣ的制备 第三节ＰＨＡ试验程序 第七章免疫胶体金试验程序 第八章免疫球蛋白亚类测定 第一节免疫扩散法 第二节ＥＬＩＳＡ法 第九章免疫血清制备 第一节 免疫球蛋白提取与纯化 第二节 几种常见抗原的制备 第三节 抗血清的制备程序 第十章细菌学试验种的几个常用技术 第一节细菌学总数估测 第二节几种常用培养记得配方 第三节常用细菌的分离鉴定程序 第十一章细胞免疫学试验程序 第一节玫瑰花环试验 第二节淋巴细胞转化试验 第十二章动物试验的一般规则 第十三张电泳技术、层析技术 第四部分家畜传染病学试验指导 家畜传染病学试验规则、实验报告内容 实验一炭疽的诊断 实验二巴氏杆菌的诊断 实验三结核杆菌病和布鲁氏杆菌的检疫 实验四猪瘟的诊断 实验五鸡新城疫的诊断 Ｉ鸡新城疫病病毒的鸡胚分离 ＩＩ免疫荧光实验 ＩＩＩ血凝和血凝抑制实验 实验六鸡马立克氏病的琼扩诊断 实验七沙门氏菌快速检测技术 实验八鸡白痢的检测 第一部分　　实验室工作守则 第一章总则 一、 严禁在实验室内吸烟、饮食（办公室除外）；严禁挪用公物。 二、 所有物品用后立即归回原处。 三、 菌种、毒种严禁带出实验室。 四、 各种病毒材料在废弃前应做好无害化处理。 五、 爱护仪器设备，用后做好清洁整理工作。 六、 使用高值仪器前仔细阅读仪器说明书，严格遵守操作规程进行操作。初次使用应在有关老师或工作人员指导下进行。 七、 损坏器皿和仪器需登记，并及时向有关负责老师汇报。 八、 坚持用水、用电安全，使用电炉时不得离开现场，下班时检查水电，锁紧门窗。 九、 厉行节约。在一切工作中树立节约精神，培养集和各种溶液用多少