小儿抗感口服液抗病毒实验的研究.pdfVIP

第四部分科学研究 提高血白蛋白中具有显著差异。 本课题还有望将研究拓展到将蛋白质充分纯化后，用蛋白酶消化芯片上的 蛋白质，分析肤段，再用生物信息学方法鉴定蛋白质序列，以实现蛋白质的最 终鉴定。 小儿抗感口服液抗病毒实验研究 单进军1，汪受传1，狄留庆2 1南京中医药大学中医儿科研究所；2南京中医药大学药学院 d,JL抗感口服液由全国名老中医、著名中医儿科专家汪受传教授的临床经 验方研制而成。方中含有金银花、连翘、绵马贯众、重楼、野菊花等，具有疏 风解表，清解热毒之功效，主治小儿感冒，风热感冒证。多年的临床实践表 明，d,JI,抗感口服液治疗儿童感冒风热证具有较强的清热解毒功效，对于多种 类型流行性感冒有显著的临床疗效。本研究对小儿抗感口服液体内外抗流感病 毒作用进行了研究，为进一步探讨其抗病毒机制奠定基础。 1材料与方法 1．1材料 1．1．1药物与试剂 小儿抗感口服液，由南京中医药大学药学院制备，批号：061224；利巴韦 林，南京金陵制药厂，批号：070102。 1．1．2病毒与细胞 小鼠模型采用流感病毒鼠肺适应株(FMl)；体外实验采用甲型流感病毒 所提供。MDCK细胞，由中国科学院上海细胞生物学研究所提供。 1．1．3动物 ICR小鼠，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。 1．1．4仪器 MAX 190，美国AD公 C02培养箱(Forma公司)；酶标仪(SPECTRA 司)；倒置显维镜(日本Olympus)；LDZ5—2型离心机(北京医用离心机 厂)。 2方法与结果 第二十七届全国中医儿科学术研讨会暨世界中医药学会联合会第二届中医儿科学术交流论文汇编 2．1流感病毒毒力测定 MDCK细胞按1×105的浓度，接种到96孔细胞培养板上，每孔0．2ml， 24h长成单层细胞，弃去上清，将病毒不同稀释比例(100、10～、10～、lO’ 溶液洗去未吸附的病毒，加入细胞培养液lml，37。C5％C02培养72h。根据出 发生病变；“+”：大约25％的细胞发生了病变；“++”：大约50％的细 “++++”：100％ 胞发生病变； “+++”：大约75％的细胞发生病变； 的细胞发生病变。 50％的卣分数．50 CPE50％病毒稀释度+ TCID50= 50％的百分数．50％的百分数 3．6 o 2．2药物对细胞的毒性作用 将MDCK细胞按l×105的浓度，接种到96孔细胞培养板上，每孔 0．2ml，24h后长成单层细胞，备用。弃去上清，将含不同浓度d,JL抗感口服液 设正常细胞对照，37℃下5％C02培养3d；利用MTT法测定细胞活力，以最 大无毒浓度为起始浓度，稀释3个浓度，进行抗病毒试验。 结果显示：d,JL抗感口服液对细胞毒性的最大无毒浓度为477mg／ml，利 巴韦林的最大无毒浓度为1．25mg／ml。表明小儿抗感口服液具有较小的细胞毒 性。 2．4药物的抗流感病毒作用11I 设空白对照组、模型组、利巴韦林组和小儿抗感口服液3个浓度共6组。 100TCID50病毒液，吸附1h，用 取长成单层的细胞，弃去上清，加入501．tl Hank’S液洗去未吸附的病毒，加入含彳同浓度药物的细胞培养液2009L，每个 浓度4个复孔，37*C5％C02培养72h。利用MTT法测定细胞活力。 结果显示：小儿抗感口服液在1l9．25、238．5、477mg／ml浓度和238．5、 477mg／ml浓度时，分别对甲型流感病毒和乙型流感病毒具有一定的抑制作 用，与模型对照组比较有统计学意义P0．05)。表明小儿抗感口服液具有良 好的体外抗甲型和乙型流感病毒作用。结果见表1、2。 第网部分