HMGB1与NF-κBp65在非小细胞肺癌组织中的表达及意义.pdfVIP

后降低了细胞因子对E—cadherin蛋白的下调。 总之，从本实验中我们可以看到ERK信号通路可能参与调节Si02诱导船E细胞的EMT。 还表明ERK抑制剂通过阻断此通路可能阻止EMT和随后的矽肺纤维化的发生及发展，其激活 机制可能与很多因素有关，还有待进一步的研究。 删GBl和NF—K Bp65在非小细胞肺癌组织中的表达及意义 徐美林 天津市胸科医院病理科30005l 肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，近年来其发生率和病死率均呈上升趋势，目前尽管 采用了各种先进的诊疗措施，使肿瘤的综合治疗达到了一个新水平，但肺癌的疗效无明显提 高，5年生存率仅有10％～15％。究其原因与肿瘤的侵袭和转移有着密切的联系。高迁移率族 蛋白B1(蹦GBl)是存在于真核细胞内非组蛋白染色体结合蛋白，研究显示删GBl参与 多种肿瘤侵袭和转移。HMGBl可通过激活核转录因子出0师．心)p65蛋白与基质金属蛋白 酶9(MMP一9)基因的启动子结合，从而使MMP．9基因的蛋白表达增高，以发挥促进肿瘤侵 袭和转移的作用。我们采用免疫组织化学方法检测了95非小细胞肺癌组织中HMGBl、 陋lcBp65蛋白的表达，并分析其与各种临床参数的关系，探讨其在非小细胞肺癌发生、发 展和转移中的作用。 材料与方法 1．材料：选取2006年10月一2008年lO月在天津市胸科医院就诊的95例非小细胞肺癌 (NSCLC)组织的石蜡包埋标本，入选患者均经手术治疗，术前均未做过放化疗，术后均 经病理证实，其中鳞癌60例，腺癌22例，腺鳞癌13例。男70例，女25例。年龄34～78岁，中 位年龄56岁。伴有淋巴结转移者58例(转移组)，无淋巴结转移者37例(非转移组)。依据2002 年国际抗癌联盟∞ICC)制定的肺癌n洲分期：I期33例，Ⅱ期18例，Ⅲ期44例；低分化47例， cm，组织结构 中分化35例，高分化13例。另外取27例癌旁正常肺组织标本(距肿瘤边缘25 正常)作为对照组。 2．主要试剂：HMGBl兔抗人多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司，NF-l(Bp65 鼠抗人单克隆抗体为美国Sarl诅Cma公司产品，PV9000免疫组织化学检测试剂购自北京中 杉金桥生物技术有限公司。DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。 3．方法：(1)免疫组织化学检测：采用免疫组织化学SP三步法，石蜡组织连续切片(厚 约4lIⅢ)，切片常规脱蜡水化后，于枸橼酸缓冲液中高压抗原修复，加一抗4℃过夜，二 抗37℃孵育，DAB显色、复染、脱水、透明、封片。以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为 阴性对照。(2)结果判断：染色阳性者呈黄色或棕黄色颗粒。HMGBl蛋白阳性和I限．1cBp65 147 蛋白阳性均定位于细胞质和(或)细胞核。根据染色细胞百分率和染色程度进行评定和分析 【4】：每例均随机观察lO个高倍视野(x400)，每个视野计数100个细胞，阳性细胞率=阳性 细胞数／观察细胞数x100％。阳性细胞率计分标准：10％为0分，11％～25％为1分，26％～ 50％为2分，51％75％为3分，75％为4分。染色强度：黄色为1分，棕黄色为2分，棕 褐色为3分。将阳性细胞率得分和染色强度得分相乘即为最后得分：0分为阴性(．)，14 和(+)定为蛋白低表达，(++)和(卅)定为蛋白高表达。 4．统计学方法：采用SPSS13．0统计学软件进行数据分析，两样本率的比较采用四格 表资料的#检验，多样本率的比较采用行×列表资料的f检验，HMGBl和NF-r,Bp65二者之 间的相关性用Spearman相关分析，以P0．05为差异有统计学意义。 结果 间质炎性细胞的胞质和(或)胞核均可呈高表达，NF．kBp65蛋白表达于癌组织中肿瘤细胞 的胞质和(或)细胞核，间质细胞基本无表达，呈淡黄至棕黄色。且伴有淋巴结转移的肿瘤 细胞，其HMGBl蛋白和NF-r,Bp65蛋白阳性表达均高于无淋巴结转移者，具有统计学意义。 蛋白表达呈显著正相关(r--0．443，P0．05)。