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鼠伤寒沙门氏菌基因敲除的研究进展 董方    曾明*  中国食品药品检定研究院肠道细菌疫苗室  卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室，北京  100050  *通讯作者：zengming@nifdc.org.cn  摘要 鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium ）是一种肠道致 病菌，可感染动物和人，并通过多种途径来逃避人体抗感染防御系统， 在人体内存活并造成持续感染，可引起食物中毒，胃肠炎等肠道传染 病，近些年来应用 PCR 一步失活技术结合λ-Red 重组系统及转座子 系统对鼠伤寒沙门菌的研究受到人们的关注，通过采用上述两种技术 进行的鼠伤寒脂多糖、鞭毛、致病岛、二元调控系统及其他相关基因 的敲除，研究缺失相关基因后细菌的表型、毒力及侵袭力等特性发生 改变，对于细菌的致病机制、特定基因的作用机理、新型疫苗的研发 以及减毒载体的构建等具有重要参考价值。。本文对相关研究进展综 述如下。 关键字 鼠伤寒沙门氏菌 λ-Red 重组系统 转座子系统 基因敲 除 Abstract Salmonella typhimurium is an intestinal pathogen that infects animals and humans. In human beings, Salmonella typhimurium is capable of survival and persistence via many ways to evade the defense system. It can produce systemic diseases such as food poisoning, gastroenteritis and other intestinal diseases. However, there is lack of effective anti-infective vaccines. In recent years, with the application of PCR combined with λ-Red recombination system and transposon system, salmonella typhimurium research is more popular. This article reviews the deletion of lipopolysaccharide, flagella, pathogenicity island, two-component regulatory system and other genes, and bacterial phenotype, virulence and invasive ability were changed. It is important to understand the pathogenesis, certain gene mechanism, attenuated delivery vector construction, novel vaccines and monoclonal antibody development. Key words: Salmonella typhimurium; λ-Red recombination system; transposon system; gene knock-out 鼠伤寒沙门氏菌是一种兼性胞内寄生菌，可在人类中引起伤寒肠 胃炎病而在鼠类中引起伤寒病，。鼠伤寒感染小鼠后发病是伤寒症状， 因此鼠伤寒常作为模型广泛用于人类伤寒的相关研究。最新研究表 明，鼠伤寒也作为模式菌株用来研究哺乳动物胃肠道的免疫机制，如 病原菌是如何应答及破坏这些免疫机制的。本文综述了鼠伤寒基因敲 除的研究进展，来探究鼠伤寒染色体基因敲除后细菌发生在表型，毒 力，侵袭力等方面的变化，为鼠伤寒作为活菌载体及研制新型疫苗提 供了重要信息。 一、细菌基因敲除方法对鼠伤寒沙门氏菌的相关研究分为两方面， 一方面是缺失突变相关基因，以研究特定基因的功能，并构建相应的 减毒载体；另一方面是通过蛋白质组学及免疫学，研究细菌的成分， 如外膜蛋白等，研发疫苗。缺失相关基因近些年主要是采用两种方式： 一种是利用PCR 一步失活技术结合λ-Red 重组