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第27卷 第6期 环 境 化 学 Vo1．27，No．6 2008年 11月 ENVIRONMENTAL CHEMISTRY November2008 丁草胺和乙草胺对蚯蚓 CAT和 SOD活性的影响 刘嫦娥 段昌群一 王 旭 杨 媛 刘 飞 朱辉清 陈运锋 王汉明 (云南大学生命科学学院暨云南生物资源保护与利用国家重点实验室培育基地，昆明，650091) 摘 要 研究土壤中丁草胺和乙草胺对蚯蚓抗氧化酶系CAT和SOD的影响．结果表明，随着暴露时间的延 长，蚯蚓体组织的CAT和SOD活性先增大后降低 ，与对照相比，蚯蚓 CAT和SOD活性表现为低浓度诱导 和高浓度抑制；在一定暴露时间内，随着丁草胺和乙草胺浓度的增加，CAT和SOD活性呈抛物线型剂量- 效应相关关系；丁草胺和乙草胺暴露浓度与蚯蚓 CAT和SOD活性均呈现出抛物线型暴露时间一胁迫效应的 相关关系．不同酶对毒性效应的响应域值不同，其敏感性大小为：SODCAT．根据两个指标对污染物浓度 响应域值的不同，建立剂量一效应关系与时间一效应关系． 关键词 丁草胺，乙草胺，蚯蚓，SOD，CAT． 有关乙草胺和丁草胺的研究报道很多，如乙草胺和丁草胺在土壤中的移动性…、吸附性 、降 解 和毒性效应 --7]，以及污染物对土壤微生物的数量和土壤酶活性的影响 。和污染物对蚯蚓抗氧 化酶活性 等． 本研究探讨丁草胺和乙草胺对土壤动物蚯蚓抗氧化酶系CAT和SOD的影响，为 CAT和SOD能否 作为除草剂的生物标记物提供科学依据 ． 1 实验部分 1．1 供试材料 供试动物 国际蚯蚓试验标准蚓种赤子爱胜蚓 (天津贾立明蚯蚓养殖有限公司)，对污染物具有 中等的敏感性，试验蚯蚓为性成熟、有生殖环的成蚓 ，平均鲜重 300--350mg，实验前驯服7d以上 ． 供试农药 乙草胺和丁草胺 (南通江山农药化工股份有限公司，纯度95％)原药，乙草胺和丁草 胺标准样品 (北京农业部药检所，纯度98．50％)． 供试土壤 采 自昆明市郊区的荒山(未使用过除草剂)，为砖红壤，混加适量的腐殖质 ．供试土 壤的理化性质为：pH值 (HO)6．85，有机质 16．63g·kg～，速效氮45．32mg·kg～，速效磷 15．46 mg ·kg～． 1．2 实验方法 丁草胺设32，50，79，126，200和316mg·kg 六个浓度；乙草胺设 l3，2l，33，55，83，132 mg-kg 六个浓度 ；每个处理浓度设3个重复 ． 每盆装入2kg土壤，将乙草胺和丁草胺按浓度计算后称重，与土壤充分混匀，再接种40条蚯蚓 ． 置于大棚里(有遮阴防护设施)，温度为22_24cI=，每天不定时的利用土壤水分速测仪PR1测量含水 量，保证土壤持水量为35±1％，分别于第0，1，4，7，10，15天随机各采集 3条蚯蚓进行分析． 将蚯蚓冲洗干净，吸干水分，放人研钵中，加入 5倍于样品量的蒸馏水 (1__4cI=)，进行匀浆， 将匀浆液移人5ml离心管，用冰冷蒸馏水稀释至 3．5ml，于 10500r·rain 在4~C下离心30min．吸出 上清液，移人另一离心管，于3000r·min 在4~C下离心5min．上清液即为粗酶液，备用． 1．3 抗氧化酶SOD和CAT活力的测定 采用硝基四氮唑蓝(NBT)还原法测定SOD活性 ．CAT采用Amano法的改进型测定，在规定条件 下每分钟分解 1Ixmol过氧化氢所需的酶量表示过氧化氢酶单位 ．酶的活力采用抑制 NBT光化还原 2008年 1月4日收稿． 云南大学首届创新团队计划项 目，云南省 自然科学基金重点项 目 (2002c00012)，云南大学本科生科研项 目． 通讯作者 6期 刘嫦娥等：丁草胺和乙草胺对蚯蚓CAT和SOD活性的影响 757 50％为一个活力单位，用U．mg protein表示 ．蛋 白含量用考马斯亮蓝法测定 ． 所有数据处理均采用统计分析软件 SPSS进行 ．以3个平行组数据的平均值 ±标准差 (Means± SD)表示 ．采用单因素方差分析(ANOVA)和Duncan检验法统计分析，并以P0．05，P0．05，P 0．01分别表示