天蚕素抗菌肽优势应用新进展.pdfVIP

天蚕素抗菌肽的优势及应用新进展 李 希 宋智娟 李 波 （北京中农颖泰生物技术有限公司，北京，100192） 摘 要：抗菌肽是进化上高度保守、普遍存在的天然免疫系统因子，具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤等 多种生物学活性，且不易形成耐药性和药物残留。天蚕素抗菌肽是最早被分离出的昆虫类抗菌肽，也是迄 今为止研究最为透彻的一类抗菌肽。研究表明，经过人工改造的杂合抗菌肽比天然抗菌肽具有稳定性好、 抗菌谱广、活性更高等优点。本文对天蚕素抗菌肽的优势及其在畜牧生产中的应用新进展进行了综述。 关键词：天蚕素抗菌肽；抗菌肽；优势；应用 长期滥用抗生素不仅导致了畜禽免疫力降低和动物产品药物残留，更为严重的是，随着 传统抗生素的毒副作用及其耐药菌株的出现，许多致病菌几乎对现有的抗生素均产生耐药 性，对人类的健康构成了巨大的威胁。寻找真正安全、高效的抗细菌和病毒感染药物已成为 人们关注的焦点。天蚕素抗菌肽其广谱抗菌性、耐药率低、具有免疫调节的功能和独特的作 用机制逐渐在医药、农业、畜牧业等领域显示出广泛的应用前景。 1 天蚕素抗菌肽 天蚕素抗菌肽（Cecropins ）属于阳离子抗菌肽家族中重要的一族，最早由瑞典科学家 Boman等于1980年用阴沟通杆菌及大肠杆菌诱导惜古比天蚕 （Hyalophora cecropia ）蛹后发 现。天蚕素抗菌肽是世界上发现最早，也是研究最彻底、效果最明显的一类抗菌肽，是昆虫 非特异性免疫系统的重要组成部分，一般由31-39个氨基酸组成，分子量约为3.5-4kDa左右， 其分子结构相对保守，主要由α 螺旋构成，属于α 螺旋类抗菌肽。这类抗菌肽热稳定性好， 无免疫原性，抗菌能力强，能有效抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长。研究发现天蚕 素抗菌肽对一些真核细胞不具毒性作用，如家蚕cecropin A和cecropin B 能够抑制并杀死白 色念珠菌，但对人体细胞株Jurkat没有毒性[5]，即使在高浓度下，也不会使真核生物的红血 球发生溶解破裂[2]。这些结构和功能上的特性使天蚕素类抗菌肽成为抗菌肽应用和研究的 重要对象。 天蚕素抗菌肽CAD （Cecropin A and D，CAD ）是对Cecropins类抗菌肽改造过程中，通 过氨基酸替换的方法，设计合成的由含正电荷较高的Cecropin A （1-11）片段和疏水性较强 的Cecropin D （12-37 ）片段构成的杂合肽。CAD 由37个氨基酸组成，分子量为3.8kDa，其二 级结构中78.38%为α 螺旋，其余为无规则卷曲。其中Cecropin A （1-11）片段被认为能形成 典型的α 螺旋结构。研究表明CAD对被测试的6种细菌的抗菌活性分别为天蚕素D抗菌活性 的5-55倍，与天蚕素A相比，其抗菌活性也略高。 目前该杂合肽CAD 已由国家饲料工程技术研究中心通过基因工程方法在枯草杆菌表达 载体中表达获得，表达产物活性高、理化特性好，且抗菌特性比目前国内外文献报导的具有 优势。通过微生物发酵生产顺利解决了抗菌肽产品生产成本昂贵这一限制其广泛应用的瓶 颈，在兽药和饲料添加剂领域具有广阔的应用前景。 2 天蚕素抗菌肽的优势 2.1 活性谱广 天蚕素抗菌肽对绝大多数革兰阴性菌和革兰阳性菌有显著的抗菌活性，并对病毒、真菌 甚至寄生虫也有一定的杀伤作用。 2.1.1 抗细菌活性 天蚕素抗菌肽的抗细菌活性是通过破坏细菌细胞膜的结构和功能实现的。抗菌肽大多带 正电荷，可通过静电引力吸附于细菌表面，分别作用于革兰阳性菌的磷壁酸和革兰阴性菌的 脂多糖，破坏细菌胞壁结构，然后插入细菌胞膜，通过膜渗透作用改变胞膜通透性，使细菌 内容物大量外流，最终导致细菌死亡。体外抑菌试验已证明，天蚕素抗菌肽能有效抑制沙门 氏杆菌、大肠杆菌、金黄色葡糖球菌、魏氏梭菌、鳗弧菌、嗜水气单胞菌等有害菌，但是对 乳酸杆菌、双歧杆菌等有益菌没有伤害。谯仕彦（2012 ）抗菌肽对耐甲氧西林金黄色葡萄球 菌ATCC43300 的体外杀菌实验显示，用4.69μ g/ml 的抗菌肽处理的试验组菌体出现穿孔、破 裂、萎缩，平均直径为0.621um，与对照组 （0.643um ）相比差异极显著（P 0.001 ）。随处 理时间的延长，细胞出现萎缩，直径变小，内容物大量外泄，60min后，几乎所有细胞都破 裂、死亡。 2.1.2 抗病毒活性