TaqMan—MGB探针实时荧光PCR在β地中海贫血植入前诊断中的应用研究.pdfVIP

维普资讯 热董医学杂志2007年 12月第7卷第 12期 · l155 · 文【章编号】 1672．3619(2007)12．1155-04 · 基 础 研 究 论 著 · TaqMan—MGB探针实时荧光PCR在 p地中海贫血植入前 诊断中的应用研究 尹爱华 1，张祥忠 ，何蕴韶3 梁驹卿 ，吴菁 1，麦明琴 ·，潘小英 ·，张畅斌 ·，梁国贤 (1．广东省妇幼保健院产前诊断中心，广州510010； 2，中山大学附属第一医院血液科，广州510080； 3．中山大学达安基因诊断中心，广州510080；4．香港大学玛丽医院妇产科) 摘【要】 目的 建立单细胞MGB探针荧光PCR检测B地贫的方法 以及在B地贫PGD中的应用研究。方 法 获取B地贫基因携带者单个淋巴细胞，建立稳定的单细胞MGB探针荧光 PCR检测技术，并对2例双方均 为B地贫基因携带者的夫妇应用 MGB探针荧光PCR进行了B地贫的PGD。结果 利用单细胞MGB探针荧光 PCR检测了B地贫基 因携带者 的200个单个淋 巴细胞的基因型，平均扩增效率为 94％，平均等位基因脱扣 (ADO)率为2．5％。对两对夫妇进行4个周期PGD，共活检 16个胚胎，获得 16个卵裂球，其中15个卵裂球扩增 成功，扩增效率为 93．8％，ADO率为6．2％。14个胚胎经PCR分析后获得明确诊断，移植 了4个胚胎 ，获得 1例 临床妊娠。孕 11周时经腹吸取绒毛，证实为完全正常胚胎，最终分娩了一正常女婴。结论 应用单细胞MGB探 针荧光PCR技术可对 B地贫以及其它单基因遗传病进行植入前遗传学诊断，达到优生 目的。 【关键词】 B地中海贫血；MGB聚合酶链反应；植入前诊断 中图分类号：R556．61 文献标识码：A Application ofReal·T·imeFluorogenicPCR intheDiagnosisofBeta·T·halassemia beforeEmbryoImplanattion YIN Ai-hua，ZHANG Xiang—zhong，HEYun-shao，LIANGJu—qing，WU Jing，MAIMing-qin， PAN Xiao—ying，ZHANG Chang—bin，LIANG Guo—xian (thePrenatdDiagnosticCenter，theMaternalandChildHospitalofGuangdongProvince， Guoztgzhou510010，China) A【bstract】 Objective Todevelopasingle-cellTaqMan—MGBprobereal-timefluorogenicPCRassayforthe pre-implantationgeneticdiagnosis(PGD)ofbeta-htalassemiamajor．Method Venousbloodwascollectedfromtwo pairsofmarriedcouples．Single—cellreal—timefluorogenicPCRwihtTaqMna-MGBprobewasusedtodetecthtegene muattion． Normal embryoswitllcapabfli~ ofcontinuing to dividewere transplna ted into the