食品中动物用药残留量检验方法-多重残留分析（二）.doc

食品中動物用藥殘留量檢驗方法－多重殘留分析（二） 100年11月7日署授食字第1001904025號公告訂定 101年6月19日署授食字第1011902190號公告修定 1. 適用範圍：本檢驗方法適用於畜禽水產品中西氟沙星（ciprofloxacin）等48品項動物用藥（品項見表一及表二）多重殘留分析。 2. 檢驗方法：檢體經萃取後，以液相層析串聯質譜儀（liquid chromatograph/tandem mass spectrometer, LC/MS/MS）分析之方法。 2.1. 裝置： 2.1.1 . 液相層析串聯質譜儀： 2.1.1 .1. 離子源：電灑離子化（electrospray ionization, ESI）。 2.1.1 .2. 層析管：ACQUITY UPLC? HSS T3，1.8 μm，內徑 2.1 mm × 10 cm ，或同級品。 2.1.2 . 均質機（Homogenizer）。 2.1.3 . 旋渦混合器（Vortex mixer）。 2.1.4 . 超音波振盪器（Ultrasonicator）。 2.1.5 . 離心機（Centrifuge）：可達 3500 ( g以上，控制溫度可達 4( C 以下者。 2.1.6 . 振盪器（Shaker）。 2.1.7 . 減壓濃縮裝置（Rotary evaporator）。 2.2. 試藥：乙腈及甲醇均採用液相層析級；甲酸、 二甲 基甲醯胺（dimethylformamide）、無水硫酸鈉及正己烷均採用試藥特級；去離子水（比電阻於 25( C可達 18 M ((cm以上）；西氟沙星（ciprofloxacin）等動物用藥對照用標準品共48品項。 2.3. 器具及材料： 2.3.1 . 離心管：50 mL，PP材質。 2.3.2 . 濾膜：孔徑 0.22 (m，Nylon材質。 2.3.3 . 容量瓶：100 mL。 2.4. 試劑之調製： 2.4.1 . 50%甲醇溶液：量取甲醇50 mL，加去離子水使成100 mL。 2.4.2 . 含5%甲醇之乙腈溶液：量取甲醇50 mL，加乙腈使成1000 mL。 2.5. 移動相溶液之調製： 2.5.1 . 移動相溶液A： 　　? 去離子水與甲酸以99.9：0.1（v/v）之比例混勻，以濾膜過濾，取濾液供作移動相溶液A。 2.5.2 . 移動相溶液B： 　　? 甲醇與甲酸以99.9：0.1（v/v）之比例混勻，以濾膜過濾，取濾液供作移動相溶液B。 2.6. 標準溶液之配製： 　　? 取動物用藥對照用標準品各約10 mg，精確稱定，分別以甲醇溶解並定容至100 mL，piromidic acid以二甲基甲醯胺溶解並定容至100 mL，作為標準原液。臨用時，分別取適量標準原液共置於容量瓶中，以50%甲醇溶液稀釋至0.005～ 1.0 (g /mL，供作標準溶液。 2.7. 檢液之調製： 　　? 將檢體細切均質後，取約 5 g ，精確稱定，置於離心管中，加入含5%甲醇之乙腈溶液 25 m L，均質3分鐘，加入無水硫酸鈉 1? 0 g ，振盪10分鐘，於 4(C 以3500 ( g離心10分鐘，取上清液，離心管中沈澱物再加入含5%甲醇之乙腈溶液25 mL，振盪10分鐘，於 4(C 以3500 ( g離心10分鐘，合併上清液，移入分液漏斗中，加入乙腈飽和之正己烷溶液30 mL，振盪3分鐘進行液／液分配，收集乙腈層，以 40(C 減壓濃縮至乾，殘留物以50%甲醇溶液溶解並定容至1 mL，經濾膜過濾後，供作檢液。 2.8. 基質匹配檢量線製作： 　　? 取空白檢體依2.7.節調製空白檢液，於液／液分配處理後所得之乙腈溶液中分別添加不同濃度標準溶液1 mL，將此溶液濃縮至乾，殘留物以50%甲醇溶液溶解並定容至1 mL，經濾膜過濾後，依下列條件進行液相層析串聯質譜分析。就各動物用藥之定量離子波峰面積與對應之各動物用藥濃度，分別製作基質匹配檢量線。 　　液相層析串聯質譜分析測定條件（註）： 　　　　層析管柱溫度： 35(C 。 　　　　移動相溶液：A液與B液以下列條件進行梯度分析 時間（min） A（%） B（%） 0.0 ( 2.0 96 ( 95 4 ( 5 2.0 ( 3.0 95 ( 80 5 ( 20 3.0 ( 6.0 80 ( 75 20 ( 25 6.0 ( 8.6 75 ( 73 25 ( 27 8.6 ( 14.5 73 ( 63 27 ( 37 14.5 ( 14.7 63 ( 0 37 ( 100 14.7 ( 18.7 0 ( 96 100 ( 4 18.7 ( 20.0 96 ( 96 4 ( 4 ?