登革病毒感染的实验室诊断与疫苗研究进展.pdfVIP

中国人兽共患病学术研讨会论文集 9 登革病毒感染的实验室诊断和疫苗研究进展 严延生，翁育伟，林春芳，叶 莺 福建省疾病预防控制中心，福州350001 登革热是一种由蚊媒传播的传染性疾病，临 。靶分子，是实验室建立诊断方法的重要基础。 床上可表现为从无症状感染到致死性疾病的多种 2、登革热感染的诊断方法回顾 症状。近50年来，由于全球人口流动和媒介扩散， 2．1、病毒分离及鉴定技术在感染早期，登 登革热病例不断增加，波及范围日益扩大。目前， 革热病毒分离及鉴定是传统方法中唯一能确诊病 登革热已波及1lo个热带和亚热带国家，成为全 例的方法。在病毒的分离中。蚊子的胸内接种最 球公共卫生问题。控制登革热的重点之一在于早 为敏感。但由于技术要求高，培养蚊子需要特殊 期发现登革热病例并进行有效的临床管理。这种 的容器等原因，所以常规诊断多采用细胞培养法。 防治措施要求登革热流行地区提高诊断技术、早 埃及伊蚊的C6／36细胞株是登革热病毒分离试验 期发现病例，便于开展有效的医疗管理。作为传 染性疾病控制的最有效的手段，疫苗的研究和应 AP61细胞株也适用于登革热病毒的分离。哺乳动 用也是目前登革热控制研究中的热点话题，本文 物细胞株如Vero、LLCMK2和其他细胞株也可用 回顾了登革热传统的实验室诊断方法，并对正在 于分离登革热病毒，但效果较差。感染后的细胞 研发的诊断技术、以及登革热疫苗的研究进展进 用登革热各种血清型的特异性单、多克隆抗体来 行总结。 鉴定病毒的血清型。病毒检测常用的样品为血清， 登革病毒感染的实验室诊断回顾及研究进展 此外血浆、淋巴细胞和尸体的某些组织也可分离 l、登革病毒感染及其免疫学反应 到病毒。 登革病毒感染人体后，病毒可在单核等细胞 2．2、血清学方法登革热的血f青学诊断依赖 内复制并被释放到外周血，产生病毒血症。病毒 于病程的进展。通常，lgM在发病后“lo天即可 血症产生于发病前，并可维持到发病后4_5天左 检出。并可维持长达90天。IgM抗体捕获ELISA 右。感染病毒的细胞还可释放病毒非结构(NSl)(MAC—ELISA)已成为常规登革热诊断的重要方 蛋白进入血浆。随着病程的进展，血液中的NSl 法，该方法的灵敏度与特异度分别为90％和98％， 蛋白逐渐消失(发热后5“天)，感染者体内特异 但仅适用于发热I5天的病例。除尿液外，血清、 性免疫建立，病毒逐步被免疫系统清除，病毒血 血滤纸、唾液均可用于IgM抗体的检测。其他类 症逐渐消失。 似的方法包括捕获ELISA、超显微捕获ELISA、 登革病毒感染引起的免疫学反应主要包括针 斑点ELISA、AuBioDOT IgM捕捉系统和Dipstick 法。各种方法的灵敏度和特异度各不相同。免疫 对病毒包膜蛋白的lgG和IgM类抗体的生成。抗 体产生的变化与个体是首次感染还是二次感染有 学方法的局限还在于抗登革热的IgM抗体也能和 关。登革病毒首次感染的特征为缓慢的低滴度抗 其它黄病毒(如日本脑炎、圣路易斯脑炎和黄热 体反应。IgM抗体是最早出现的免疫球蛋白。发 病)发生某种程度的交叉反应。 病一周可检出低滴度的lgG抗体，此后滴度逐渐 2．2．1 升高。相反，二次感染(有过登革热病毒或其它 MAC—ELISA是检测登革热病毒的经典血清学方 黄病毒感染史的登革热患者)后产生的抗体类型 法。该方法利用4种血清型(DEN1--4)的登革 主要为IgG，并且滴度