Ezrin在食管癌细胞的生长与侵袭过程中的作用及其机制的初步研究.pdfVIP

174 肿瘤生物标志物与 肿瘤转移 Ezrin在食管癌细胞的生长和侵袭过程中 的作用及其机制的初步研究 谢剑君，许丽艳，谢仰民，张海华，蔡唯佳，周飞，沈忠英，李恩民· 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室，汕头，515031 I摘要】目的：Ezrin从属于ERM(ezrinradixinmoesin)蛋白家族，其基本功能足将肌动蛋白维系到细 胞膜和锚定到膜蛋白的特定部位上，从而参与细胞的移动和粘附。研究表明Ezrin在多种肿瘤中异常表达 并可能参与肿瘤的生长和转移。然而．到目前为止，Ezrin参与肿瘤发生发展的直接证据仍然缺乏。食管 癌中Ezrin的表达最近才得到初步地阐明。但其功能和相关机制还不清楚。本研究旨在运用RNA干扰等 方法探讨Ezrin在食管癌中的功能。方法：我们首先利用免疫蛋白印迹和免疫荧光染色的方法检测了Ezrin 在多种食管癌细胞系中的表达情况。然后以其中一种细胞(ECl09)为模型。用RNA干扰的方法成功降低 了该细胞中Ezrin的表达。然后用克隆形成、MTT生长曲线、裸鼠体内成瘤、Chamber移动实验和细胞侵 袭以及细胞粘附等实验检测了Ezrin表达对细胞生物学行为的影响。最后，联合运用eDNA芯片和免疫印 迹等方法．初步探讨了Ezrin发挥功能的机制。结果：免疫蛋白印迹的结果提示Ezrin在多种食管癌细胞 系中高表达。免疫荧光染色发现，Ezrin不但定位于胞膜下和胞浆中，同时还表达于细胞核内，核内Ezrin 主要分布于核浆中。克隆形成和MTT实验表明。Ezrin表达减少后。细胞生长减慢。裸鼠体内成瘤实验也 直接证明了Ezrin对细胞生长的影响。移动、侵袭和粘附实验揭示，Ezrin表达的减少，可以导致细胞移动、 侵袭以及粘附能力的减弱。接着我们进一步用eDNA芯片的方法揭示，Ezrin表达减少后一系列细胞生长 和凋亡相关基因、细胞移动和侵袭相荚基因以及细胞粘附相关基因均发生了差异表达．比如TGM2，CTGF 和CYR61等。最后，信号通路分析发现，Ezrin表达的减少可以抑制MAPK和TGF．B信号通路。结论：以 上结果表明Ezrin参与了食管煽细胞的生长和侵袭过程。其可能的机制是Ezrin通过调节MAPK和TGF． B信号途径影响某些细胞生长与侵袭相关基因的表达，或者是直接参与这些基因的转录调控(国家高技术 (510454I。7118419)资助项目)。 【关键词】食管癌，Ezrin，RNA干扰，eDNA芯片，生长和侵袭，MAPK和TGF．B信号通路 Rolesofezrininthe andinvasivenessofthe growth esophageal cellcarcinomacells squamous Jian-JunXic，Li—Yon Li‘ Xu，Yang-MinXie，Hai-HuaZhang，Wei·JiaCai，FeiZhou，Zhong-YingShen，En-Min 515041．PILChina totheezrinradixiu cross- 【Abstract】Objective：Ezrinbelongs moesin(ERM)familyproteins，which and the and linkaetin plasmamembrane，andis involvedin cytoskeleton actively regulatinggrowth o