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ATP检测方法在化妆品微生物检测中的应用研究 仝微微鲍其泠 罗利 沈亮 赵鑫 上海相宜本草化妆品股份有限公司技术中心上海200444 摘要：化妆品因为其丰富的营养和高水分容易受到微 生物的污染，因此微生物控制是控制化妆品质量非常重要 的一环。传统的微生物检测方法具有劳动密集且耗时长的特点。研究微生物快速检测方法有诸多潜在好处，例如加快 出库速度、可以更快地对微生物污染做出反应从而避免经济损失和声誉损失等。ATP快速检测方法是今年发展迅速的 一种快速检测方法，它最大的优势是可以在几分钟内得到实验结果。ATP检测技术在食品和公共卫生领域多有报道， 而在化妆品领域未见报道。本研究中我们就ATP在化妆品中的应性进行了探究。我们共测试了三个大类共计48个样品 中ATP含量，所用样品来自公司产品或者小样。数据显示，以41 CFU／mL的检测标准，不经校正样本阴性检 pg作为500 出率为77．1％，经过校正可以达到95．8％，其中假阴性由10．8％减少N8．7％。 关键词：ATP检测化妆品微生物 1背景介绍 化妆品因为其丰富的营养和高水分容易受到微生物的污染，因此微生物的控制是控制化妆品质量非常重要的一 环。传统的微生物检测方法一般需要2～3天。。研究微生物快速检测方法有诸多潜在好处，例如加快出库速度、可以 更快地对微生物污染做出反应从而避免经济损失和声誉损失等。 ATP快速检测方法是近年备受关注一种快速检测方法，它最大的优势是可以在几分钟内得到实验结果。Chen…对 道。 ATP(adenosine 了这个酶促反应机理pJ。 nm--一700 时释放出焦磷酸(PPi)和波长在470 nm的光(波峰：562nl-n)。反应过程如公式(1)所示。 本研究中ATP测量是在一个灵敏的光度计中进行的，它的直接测量结果用相对光单位(RelativeUnits，RLU)表 Light 示。相对光单位数值与微生物数量呈正比，即微生物数目越多，光度值越大，ATP数值越大。已知标准ATP溶液的光度 值RLUUCl，我们就可以计算出样品中ATP的含量。本文中ATP含量的计算公式如(2)所示。 山虹P。 D．Luciferin+ATP+02 ’ M92+ ATP(pgATP，mL)2毒“护(pgATP／mL) 2材料与方法 2．1仪器与试剂 ATP检测实验包(Luminultra 仪器有限公司LRH一250)。 2．2实验方法 2．2．1 ATP测试操作步骤：按说明书进行 2．2．2 ATP测试准确性和重复性评估 一个测试系统应有较好的重复性和准确性，这是保证正确测量的前提。 h，取单菌落到10mL无菌生理盐水中制成菌悬液，取此 我们取分离于环境中一株沉降菌，划平板，37。C培养24 1942013q帼上海第三届全国香料香精化妆品专题学术论坛 菌悬液lmL进行十倍稀释制成一些列浓度梯度的菌悬液溶液，备用。 取3mL菌悬液加到27 行ATP测试，每个浓度做三个平行。 值对数值为横坐标，以菌落数目对数值为纵坐标做图，如图l所示。从图1中可以看出随着菌数目的增加，ATPiJflJJ试值 也增加，并且二者成线性关系，R2=0．9999。 表1可以看出单次测量的偏差系数在3．2％～20％之间。 表1 ATP测试重复性和准确。}生评估 CFU／mLZ(n=3) SD CV ATP／pg 去背景ATP／pglog【PgATP／mL】log【CFU／mL】 0 26．O 5．2 20．O％ 47．7 4×104 51．0 4．6 8．9％ 93．6 45．9 1．662 4．602 4x105 311．7 40．0 12．8％