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提高载药脂质件靶向性的探讨 113 提高载药脂质体靶向性的探讨 成文彩张长英王央贡赵明崔武任 材料和方法 (一)艾氏腹水瘤皮下移檀… 选用6周龄雌性昆明小鼠15只，体重20±0．2 g，抽取艾氏腹水瘤小鼠(同济医科大学药 学院实验室提供)腹水置入无菌平皿中，0．9％生理盐水稀释3倍。制成艾氏癌细胞悬液，行小 鼠右骧下皮下接种0．2Ⅱ吐，接种成功率1CO％。 (二)紫杉辞脂质体的制备 5 体o]。精确称取卵磷脂200rng，胆固醇100mg，其摩尔比2：1。Taxolnag，其与卵磷脂摩尔比 ml溶解．将烧瓶置人40。C温水中，真空 1：40，置入小圆底烧瓶中，加入二氯甲烷与等量乙醚6 剂24“溶解脂膜，另加入20％甘露醇1．0m1．0，9％氯化钠9．0柚，混匀器混匀，经水浴式超声 处理成乳状，放入40。。C温水中真空旋蒸，除去有机溶液，即得浓度为0．5 水悬液。高效液相色谱法测定Taxol脂质体包裹率100％，将脂质体用磷钨酸负染后滴在有支 持膜的铜网上，干燥后用JEM一200透射电镜观察并摄影将电镜照片用图像分析软件测定脂质 体粒径。其中粒径为2．5 pJn者占95％。 (三)抑瘤试验 荷瘤鼠皮下移植瘤长至2em左右，即开始进行试验。随机将15只荷瘤鼠分成3组，编号 称重，每组5只小鼠，A组为空白脂质体组。将自制的不载药的空白脂质体0．3ml，自鼠尾静脉 注人，每日1次，共用4日；B组为Taxol脂质体组，按10 rag／(kg·d)剂量自鼠尾静脉注入 0．3IId，共用4次；c组为实验组。先将0．3ml空白脂质体注入鼠尾静脉，1h后再注入T口xol脂 质体3lIIl，共用4次。 (四)观察指标 1．体重变化实验开始后，隔日称小鼠体重一次，实验结束后。观察10d处死动物，取小 鼠离体肿瘤称重。用配对t检验进行统计学分析。 2．生活状况自小鼠尾静脉注入脂质体后，观察3组荷瘤鼠精神状况、饮食、活动情况及 对外界刺激的反应能力。 卫生部科研基金资助项目(NO．96—2一113) 作者单位：430030武汉，华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科(成文彰张长英)；华中科技大学同 济医学院实验医学中心棱医学教研室(王央贡崔武任)；华中科技大学同济医学院附属同济医院核医学教研 室(赵明) 114 中国癌症研究进展@ 3．病理变化将3组肿瘤块送病理检查，以了解肿瘤局部的病理改变。 结 果 (一】体重变化 组体重变化率无显著差异(P0．05)。同样，B组与C组对比，两组体重也无显著差异 (P0．05)。 裹1荷■曩俸重的变化(j±s-g (二)离体瘤重量变化 寰2荷瘤鼠离体肿瘤体重的变化(；±$，g) 表2可见，c组与A组比较肿瘤体积明显缩小，瘤体重量减轻，抑瘤率41．g％，B组 显著性差异(PO．05)。 (三)生活状况的观察 用药后3组荷瘤鼠精神状况与治疗前相似．表现活泼，无食欲减退．活动自如，无懒动表 现，未发现呼吸困难或抽搐现象，对外界刺激反应敏锐．睡眠正常．大便干燥。 (四)病理变化 镜下见A组呈典型的癌的病理学特征(图1)；B组可见散在局灶性肿瘤细胞的凝固性坏 死(图2)．肝、脾形态结构正常；C组可见肿瘤组织呈广泛性坏死，癌细胞核固缩溶解，呈现大面 积玻璃样变及纤维结缔组织增生改变(图3)。肝组织有轻度脂肪样改变，脾组织结构正常。 提高载药脂质体靶向性的探讨