纳米细菌和其检测方法研究进展.pdf

葡萄球菌（MRS）越来越成为临床棘手的问题。这些对于临床的经验性治疗有较好的参考价值，据此 推荐在临床诊治中首先采用不同机理的抗生素联合用药的方案，然后在病原学检测完成后及时调整 用药针对病原实施目标性治疗。成功的目标性治疗有赖于病原谱和耐药性的动态监测，所以，更全 面、快速地检测急性前列腺炎的致病微生物的免疫学和分子生物学检测方法是今后研究的方向。 纳米细菌及其检测方法研究进展 1 2 朱明利 花扣珍 1 2 杭州市第六人民医院开放实验室； 蚌埠医学院检验系实习生 纳米细菌（nanobacteria，NB）是芬兰科学家kajader 发现并命名的新菌种，其直径50～500nm。 他的发现弥补了细菌和病毒之间微生物研究的匮乏。由于NB 具有体积微小、细胞毒性，具备矿化能 力，广泛存在于人和哺乳动物体内的特点，在温泉碳酸盐和火星陨石中发现纳米细菌矿化石.因而引 起人类广泛关注.现已发现纳米细菌与多种疾病，尤其是组织器官硬化和结石的形成有密切关系，所 以对其检测有十分重要意义. 一、纳米细菌的生物学特性 （一）形态结构 纳米细菌是革兰阴性菌.直径50～500 纳米，为普通的细菌百分之一，呈球状或杆球状，可通过 0.1～0.4 微米的滤菌膜，有厚而坚硬的细胞外壳，不易着色，无芽孢和鞭毛。在PH 为 7.4 和生理 性钙磷浓度中能形成羟磷灰石碳酸盐结晶，从而产生坚硬的矿化外壳覆盖于菌体周围。在细胞内外 均可寄生，生长缓慢，倍增时间约3 天。能够产生内毒素，鳖实验阳性。经免疫组化后，纳米细菌 在高倍镜下呈微小的黄色至棕色杆状或球状颗粒。 （二）免疫学性质 纳米细菌与衣原体和巴尔通氏体存在着免疫交叉性，它的 16SrRNA序列与周围环境中污染菌有 高度的同源性。DNA 序列分析表明纳米细菌与蛋白细α2 亚群的布鲁菌及巴尔通氏体同属，具有相同 的 16SrDNA片段。与硫杆菌、根瘤菌也具有一定的相关性。 （三）培养特性 纳米细菌在普通微生物培养条件下不能生长繁殖，而在一般的哺乳类动物细胞培养中能够生长， 加入胎牛血清则更有利于细菌的繁殖。一般采用 RPMI1640 培养基和其含有热灭活的 10% γ-FBS 的 RPMI-1640 培养基在37℃、PH 值为7.4、5%的二氧化碳和95%的空气条件下培养3～4 周。也可采用 3T6 成纤维原细胞在DMEM 中共同培养。3～4 周后发现 1640培养管底部有白色沉淀物，且紧密粘附 与管底部。接种到改良的Loeffer 培养基6 周后可在培养皿中长出直径 1～5 毫米灰色晶体样菌落， 能够穿过培养基全层，紧密附于培养皿底部。在DMEM 中一般两天后纤维细胞变形，胞质内出现空泡。 （四）抵抗力 由于纳米细菌就具有坚硬的矿化外壳，故对理化因素抵抗力较强。有抗高温、耐强酸的特性。 能够在其他细菌不能生长的重压条件下得以生长繁殖。高剂量的γ射线在室温照射 16 小时能抑制其 ～675～ 生长繁殖。许多抗生素对其无效，而四环素能够穿透矿化外壳发挥杀菌效应。柠檬酸盐、EDTA 能够 抑制其矿化作用，但不能影响其生长繁殖。 （五）流行病学 芬兰科学家Rajander 1998 年报告5%正常芬兰人血液中以及80%土耳其血液透析患者的血液、 尿液中存在纳米细菌。此外人类唾液、牙齿表面、牙菌斑及牙髓结石中亦存在着纳米细菌。我国正 常人群中纳米细菌感染率约为8%。性别、年龄与纳米细菌感染率无明显相关性。但据调查年龄小于 30 岁的人群感染率要低于 60 岁以上人群。可通过母婴传播，一般在胎儿期和围产期内进行感染婴 儿。 二、致病性 （一）致病因素 纳米细菌具有细胞毒性，能够感染人体内绝大多数细胞，因其具备矿化能力形成晶体核心，从 而导致被感染的细胞发生骨骼外钙化，引起组织器官硬化。另外其分泌一些细菌毒素（内毒素）和 刺激机体产生细胞因子（LPS、白介素等）引起感染细胞的空泡样变性、溶解和凋亡。 （二）所致疾病 研究表纳米细菌与肾结石膀胱结石但结石多囊肾动脉粥样硬化等人类病理性钙化疾病发生相 关。纳米细菌对肾脏损坏性较大