子宫内膜癌HIV-1α、VEGF基因表达和其彩超声表现的相关性研究.pdfVIP

高无水乙醇向囊壁的深层渗透作用。 Q、VEGF基因表达与其彩超声表现的相关性研究 G050子宫内膜癌HIV．1 宋倩谢阳桂 南通大学附属中医院B超室，南通大学附属医院超声科 缺氧微环境普遍存在于实体肿瘤组织中，缺氧诱导因子．1(HIF．1)已被证实是直接对低氧作出反应的 关键蛋白质，不仅在多种恶性肿瘤中过表达，且对肿瘤的生长、血管、形成、转移、凋亡及耐药皆有影响。 作为功能亚单位的HIV-111调控密切相关于肿瘤血管生成的靶基因VEGF，促进微血管形成，加速肿瘤的 发展和侵袭。彩色多普勒超声从形态学、血流动力学等方面研究肿瘤发展的进程。本实验用免疫组织化学 法检测HIV-1 病理分型、分级及临床分期的表达情况，进而与彩色多普勒超声表现对照，探讨其相关性。 材料与方法 临床资料 60．2岁，已绝经22例。双子宫一例。不规则阴道出血(液)29例，病程七天至二年不等。其中病理分型 I型子宫内膜样癌20例，Ⅱ型lO例；病理分级分高分化8例，中分化12例，低分化10例(腺癌5例， 取同期存档的子宫内膜增生过长组织蜡块10例作为对照。 二、主要试剂与实验方法 主要试剂一抗：兔抗人HIV-1a抗体、兔抗人VEGF抗体，二抗：鼠抗兔抗体。 VISION 实验方法：采用LAB 2D全自动免疫组化染色仪，ELIVISION二步法进行染色。 具体步骤：所需肿瘤组织经由4％福尔马林固定，LEICA自动脱水机脱水，透明，浸蜡处理，包埋成蜡块， 切成厚度为4—5um的薄片，切片要求平整，尽量避免因刀的缺口造成组织划痕，‘以免影响组织细胞的形态 完整，出现非特异性着色。载玻片要经以下处理以防止脱片：经洗涤剂浸泡8．24小时，流水冲洗过液，蒸 馏水漂洗2次，浸泡于95％酒精中过夜，蒸馏水洗2次，将载玻片排列整齐烘干，经POLY-L防脱片处理。 置于温度67℃烘箱当中，烘片2小时，脱蜡至水，脱蜡要完全。PBS冲洗，抗原修复用柠檬酸盐缓冲液， 微波中火10分种，流水自然冷却。 处理完毕后放入自动免疫组化染色仪当中，编程： 从自动免疫组化染色仪中取出已染色完毕的切片，苏木素复染，0．I％HCL分化，自来水冲洗，蓝化， 切片经梯度酒精脱水干燥，(二甲苯透明)．中性树胶封固。 判定标准 Q、VEGF表达阳性为细胞质染色呈棕黄色颗粒状。计算阳性细胞百分率的方法为 光镜下观察，HIV-1 ％为(一)，10％为(+)； 三、TVCDS检测方法 512彩色多普勒超声诊断仪，阴道超声探头频率为7．5MHz。患者取膀胱截石位， 使用西门子Sequoia 将探头顶端涂以耦合剂并套上避孕套后插入阴道．作纵、横、斜多切面连续扫查，观察子宫内膜的回声、 边界及有无宫腔积液。在清晰的子宫矢状面，即为子宫内膜厚度(实际包括前后两层子宫内膜的厚度)， 如果子宫内膜被宫腔内的积液分离时，应减去积液的厚度。观察并记录子宫内膜厚度、形态及病灶的部位、 大小、回声、边缘是否规整，内膜与肌层交界面是否清晰(即弱回声晕的完整性)，病灶内部及周围肌层 的彩色血流分布和阻力指数(1u)改变，判断内膜癌及其肌层浸润程度，彩色多普勒血流特点，应用频谱 多普勒测量病变处的阻力指数(RI)，连续测量3个心动周期的Iu值，每例患者均在病灶内多点取样，取最 低的戳值。 l、TVCDS分期方法 参照FIGO(2000)分期方法，根据子宫内膜厚度及其回声异常情况，内膜与肌层交界面是否清晰， 低回声晕是否中断或消失，病灶内部及周围肌层的彩色血流分布和阻力指数(RI)改变，判断内膜癌及其 肌层浸润程度，将子宫内膜癌分为I～Ⅳ期。I期：癌瘤局限于子宫体。Ia期：肿瘤局限于内膜层；Ib期： 肿瘤浸润至肌层．但小于1／2肌层厚度；Ic期：肿瘤浸润至肌层，大于l／2肌层厚度。II期：癌瘤已侵 犯宫颈：子宫体积增大，伴有宫腔积液，宫颈内可见不均质低回声，其内血流信号明显丰富。ⅡI期：癌瘤 扩散至子宫以外，包括阴道，但未超过真骨盆。超声表现为子宫体积增大，宫腔及肌层均为不均质同声， 内见不规则无回声区，阴道壁局部增厚，宫旁可探及与子宫分界不清的低回声包块，盆腔和(或)主动脉旁 探及低回声区为淋巴结转移。彩色多谱勒超声检查，病灶周围及内部血流信号丰富。Ⅳ期：癌瘤超过