紫杉醇对小鼠Lewis肺癌抑制作用实验研究.pdfVIP

鬻杉醇对小鼠I戚肺癌抑箭作用的实验研究 紫杉醇对小鼠Lewis肺癌抑制作用的实验研究 江曼刘铭球林宜先刁路明夏东 刘晓翌李蓓芸肖静杨飞余峰 近几十年来，肺癌的发病率和死亡率均在不断上升，严重威胁人类健康和生命。由于手术 部位特殊，内科治疗依然是肺癌治疗的主要方法。随着抗肿瘤药物的飞速发展，有许多新的化 学药物正应用于肺癌的治疗中，紫杉醇是其中很有特色的化疗药物之一¨J。该药化学结构新 颖，抗癌机理独特，体内外实验证明它对许多肿瘤都有较好的活性【2,3]。美国食品药品管理局 (FDA)已批准将其用于转移性卵巢癌和转移性乳腺癌的治疗。有关紫杉醇对肺癌的作用国内 外文献报道不多，我们以接种LLC的C57BL／6小鼠为模型，探讨紫杉醇动物体内抑制肺癌的 作用及机理，为紫杉醇I临床治疗肺癌提供一些理论和实验依据。 斌料与寅法 (一J材料 1．动物岛BL／6小鼠20只，体重18--22 g，购自中国医学科学院医学实验动物研究所。 2，IJe试s肺癌瘤株购自中国医学科学院药物研究所。 3．紫杉醇注射液中国医学科学院药物研究所方起程老师惠赠。 (二)方法 。 1．瘤细胞悬液剞备取体内传代15d左右的LLC组织块，射除出血坏死组织后匀浆制成 悬液，调瘤细胞浓度为2．5x106个／ml。 2．动物分组20只GsvBL／6小鼠于右腋下皮下接种瘤细胞悬液0．5nd后随机均分为两 组，白第5天开始，对照组每日每只腹腔注射生理盐水0．2 nil，治疗组每日每只腹腔注射紫杉 醇10Ⅱlg／l【g，均连用10d。第18天时处死全部动物。 瘤体积并绘制生长曲线。 4．瘤重测量瘤结节完整取出后用精度为1nag的天平称重。 5．肺转移灶计数【5J动物处死后从喉以上切断并分离气管，气管内注入10％中性缓冲甲 醛使肺膨胀，将气管连同肺取下经10％中性缓冲甲醛固定、铁苏木索液染色、0．5％HCI褪色、 常规脱水透明后，计数染成黑色的肺转移灶。 6．流武细胞仪检测瘤细胞凋亡方法参见文献[6，7]，并略有改动。瘤组织去除出血坏死 后剪成糊状，经消化、过滤、离心后制成单细胞悬液。70％冷乙醇固定4℃过夜。用PBS洗涤 本课题受湖北省自然科学基金(94j080)与湖北省科委重点科研课题项目资助(962P1106) 作者单位：430071武汉，湖北医科大学病理学教研室 300 中国癌症研究进展@ 30min后上机检测。 并调瘤细胞浓度为1×106／ml，以EB综合染液行“一步法”荧光染色412 7．光镜和透射电镜观察按常规方法进行。 8．统计学处理t检验和z2检验。 结 果 1．两组肿瘤体积的动态变化图l为两组肿瘤体积一时间生长曲线。对照组肿瘤生长快， 体积增长迅速，生长曲线陡直上升；治疗组肿瘤生长明显受抑制，体积增长缓慢，生长曲线平缓 且位于对照组曲线之下。 p 吕 3 鞋 蛙 霜 争 {娶 蠡 M：m，¨¨m，咐％¨∞o 11 13 接种肿瘤后天数 圈1肿瘤体积．时间生长曲线 2．两组瘤重比较第1 下瘤重为0．588±0．040 g。经t检验，差异有极显著性(P0．01)。表明紫杉醇可明显抑制 U￡的生长。 uC的肺转移。 4．凋亡率厦细胞周期变化表1显示了两组瘤细胞凋亡率及细胞周期时相变化，可见紫 杉醇能明显诱导LLC细胞的