蜈蚣胃蛋白酶酶解混合多肽体外抗凝活性和组分分析研究.pdfVIP

2009·全国中药创新与研究论坛·论文集 甚至氨基酸。不同的酶解工艺所得到的蛋白组成有所不同。全蝎复合酶解与胰酶酶解图谱较相似， 与薄层色谱结果相吻合。 3小结与讨论 目前，动物蛋白水解的方法主要有酸法、碱法和酶法水解【9】。与酸(碱)法水解相比，酶解法具有 效率高、条件温和、不破坏热敏性成分等不可比拟的优点，已逐渐成为代替酸(碱)法水解的最有效 的水解方法。对动物药而言，酶可作为动物药提取过程中的激活剂，仿生酶解法则模拟动物药口服 后体内消化过程，将大分子的蛋白质分解成小分子氨基酸和多肽，更易于溶出和人体吸收。 仿生酶解法所得全蝎酶解物抗凝血效果显著，今后还将对其组分进行分析，并对其主要功能性 成分分离纯化，研究其在抗凝血和溶栓方面的作用。 和其他类样品比较起来，蛋白样品成分复杂，重现性较差，且缺乏对照品，对其组成了解甚少， 故本实验对全蝎酶解物进行薄层及液相分析，为质量标准的建立奠定基础。 参考文献： 【1】雷出香，彭延古，徐爱臣中药全蝎的研究进展m．湖南中医学院学报．2006，26(4)：60-61． [2】郝晓云，彭延古，肖长江．全蝎提取液对血液凝固的影响叨．血栓与止血学报．2001，7(4)：158～159． 【3】徐国军，何宏贤，徐珞珊等．中国中药材学(下)【M】．北京：中国医药科技出版社，1996．1797～1800． [4】林超，王玉蓉，吴清等．全蝎的酶解工艺研究阴．北京中医药大学学报．2005，6：66--69． 【5】刘嘉瀛，黄世岭．考马斯亮兰G-250蛋白质定量测定法及其应用【J】．国外医学临床生物化学与检验学分 册．1990．1 1(2)：12—16． [6】徐英操，刘春红．蛋白质水解度测定方法综述【J】．食品研究与开发．2007，28(7)：173-176． 【7】包怡红，徐思源．复合酶解乳清蛋白制备降血压肽的研究[J】．中国乳品工业．2007，35(7)：28 【8】冯光军，朱正光，余传林等．水蛭乙醇提取物体外抗凝血活性研究．中药材．2007，8(30)：909-911． [9】9汤高奇，柳艳霞，杨继红．酶法水解动物蛋白工艺研究川．杨凌职业技术学院学报．2004，3(4)：6—7 蜈蚣胃蛋白酶酶解混合多肽体外抗凝活性与组分分析研究 黄能听1王玉蓉1许文博1赵韶华2张玉杰1 (1北京中医药大学中药学院，北京100102；2河北以岭医药集团，石家庄050035) 摘要：目的初步分离蜈蚣胃蛋白酶酶解液的抗凝活性部位，检测活性部分的分子量分布范围。方接用葡聚糖凝 胶G．100过滤层析柱对蜈蚣＼胃蛋白酶酶解液进行初步分离，以紫外检测法、考马斯亮兰法检测，合并凝胶层析蛋白 流分；以APTT凝血时间为指标，检验各组分体外抗凝活性；通过M』址DI-TOF—MASS法检测分离部分的分子量分 布范围。结果蜈蚣酶解液通过凝胶过滤层析分得的两组分抗凝效果显著，分子量分布范围850～5300。结论体外 抗凝试验表明凝胶过滤层析法纯化分离蜈蚣胃蛋白酶酶解液方法可行，MAI．DI-ToF-MASS表明活性组分为小分子 肽类。 关键词：蜈蚣；酶解；凝胶过滤层析：抗凝血：活性组分；MALDI-TOF．MASS and invitroonmixture Compositionanalysisanticoagulantactivitystudy 152 2009·全国中药创新与研究论坛·论文集 of fromthe of peptide pepsinenzymolysisliquidcentipede Abstract：AMTo the active fromthe of separateanti-coagulatecomponents enzymolysis pepsin liquidCentipedebygel filtration detectthedistributionofthosemolecular T