鸭IFN-α成熟蛋白基因原核表达、产物纯化与复性关键技术及其抗病毒活性.pdfVIP

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2017-08-10 发布于安徽
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鸭IFN-α成熟蛋白基因原核表达、产物纯化与复性关键技术及其抗病毒活性.pdf

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 鸭邛N吨成熟蛋白基因原核表达、产物纯化和复|生关键技术及其抗病毒活性 f 龚永强6，程安春’1．2．-，汪铭书‘u，杨梅1，张瑶2，陈斌1 (1．四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心，四川雅安625014；2．动物疫病与人类健康四川省诱导表达条件、表达产物的纯化和复性关键技术及其抗水疱性口炎病毒(VSV)活性、保存温度对 IPl℃诱导获得高效表达，表达的重组蛋白分子量大小约37KD，以包涵体形式存在：重组蛋白经镍金属螯合介质鸭干扰素一耐鸭瘟强毒可以表现出抑制作用；工程菌种的袁达能力在4C和．20℃分别保存40d和90d 即逐渐丧失，一70℃保存1年仍能够获得稳定表达。本复性方法成功的实现了鸭干扰素．a的柱上层析复性，表现出了对VSV和DPV强毒的抗病毒活性，为鸭干扰素吨的临床应用提供了试验数据．关键词：鸭IFN．毡：成熟肽基因：原核表达；色谱复性：质粒稳定性 studieson of and Preliminaryprokaryoticexpression，thekeytechniquepurification ofduckIFN一位mature its virus and refoldeing fragmentactivityagainst An-chun 1,3 GONG Mei Yao Bin Yong-qiang1，CHENG 1,2，WANG 1一，YANG1，ZHANG2，CHEN Ming-shu diseaseresearchcenter ofanimaldiseaseand (1．Avain ofSichuanAgriculturalUniversity,yaan，625014；2．Keylaboratory humanhealthofSichuan Center ofAnimal province；3．Research MicroecologicalEnginecring,SichuanAgricultural University，Yaan，Sichuan,625014，只R．China) Abstract：Duck wasclonedtoPMDl8．Tvectorandinserted interferon-ct(DulFN．∞matureproteingene intothe recommendedwastransformedinto expressingplasmid／pET32a+．Thisplasmid engineering some asthe of iterns，suchcultivatedconditions bacteria／BL21(DE3)．Thenimportant expressingproteins in ofthe and to BL21(DE3)／pET32a