高效液相色谱法检测牛乳中掺加的胶原水解蛋白.pdfVIP

l{-l{Ichinadairy．net 中国乳品工业 dairyINDUSTRY rpgy@chinajouma1．net．Cll ___I 口 效液相色谱法检测牛乳中掺加的胶原水解蛋白 同 李景红，孟祥晨 (东北农 业 大学 乳 品科 学教 育部 重点 实验 室 ／食 品学院 ，哈 尔滨 150030) 摘 要!本研 究的 目的是建立采用高效液相色谱测定牛乳中掺加胶原水解蛋 白的方法 其基本原理是通过高效液相色谱法测得羟脯氨 酸的含量，由测得的羟脯氨酸含量换算得 出乳 中掺加的胶原水解蛋 白的量。以synmletry-C18(150nlinx3．9irlm，i．d．5Ixm)为色谱柱， 2,4一二硝基氟苯为衍生试剂 ，梯度洗脱 。流动相A：浓度为O．05mol／L乙酸钠缓冲溶液 (pH=6．5，含1On11J／L四氢呋喃)，流动相B：乙腈一水 (体积比1：1)．．羟脯氨酸质量浓度在2~10mg／LgJ范围内与峰面积之间具有 良好的线性关系，回收率为93．47％-1(11．20％，检 出限为 2．5mg／L 测定结果的相对标准偏差为1．62％ 关键词：高效液相色谱法；柱前衍生 ；胶原水解蛋白；2,4一二硝基氟苯 ；羟脯氨酸 中图分类号 ：TS252．7 文献标识码：A 文章编号：1001—2230(2008)11-0056—04 Detection ofhydrolyzedanim alcollagen proteinsinm ilkbyHPLC LIJing—hong，MENGXiang—chen (KeyLaboratoryofDairy Science，M inistryofEducation，FoodScience TechnologyCollege，NortheastAgricultural University，Harbin150030，China) Abstract：T’heaim 0fthisstudyistOestablishamethodtOdetemfinehydrolyzedcollagenproteinsadulteratedinmilkbyHPLC．Thecontent ofhydroxyproline(Hyp)canbedeterminedbyHPLC，andthecontentofhydrolyzedcollagenproteinsinadulteratedmilkwasthencalculated byHypcontent．Chromatographicconditionsincludethatasynunetry—C18(150n1Inx3．9111111，i．d．5 m)wasused，themobilephaseAwas 0．05mol／Lsodiumacetatebuffer(pH 65containing10I11L／Itetrahydrofuran)andthemobilephaseBwasacetonitrile～water(volumeratio beingI：1)，theseparationwasperformedwithgradientelution，and2,4一dinitrofluoroenzene (DNFB)一acetonitrilewasusedasthepre—col— unlnderivatizationoftheHyp．Therew,asagoodlinearrelationshipbetweenthepeakareaandtheconcentrationoftheHyp intherangeof 2～10mg／L．Thedetectionlimitis2．5mg／L，therecoverywas9347％～101．20％，andtheR SD was1．62％． Keywords：HPLC；pre—columnderivatization；hydrolyzedcollagenproteins；2，4一dinitrofluorobenzene；Hydroxyproline