高效液相色谱法同时测定桂枝茯苓方超临界二氧化碳萃取物中3种活性成分.pdfVIP

· l5l2 · HeraldofMedicineVo1．27No．12December2o08 ·_-d 口 同效液相色谱法同时测定 桂枝茯苓方超临界二氧化碳萃取物中3种活性成分 李 芳 ，张 利 ，苏保全 ，李 炜 ，孙秀梅 ，张兆旺 (1．山东中医药大学药学院，济南 250355；2．西安天健医药科学研究所，710075) [摘 要] 目的 建立桂枝茯苓方超临界二氧化碳(CO)萃取物中肉桂酸、桂皮醛和丹皮酚的含量测定方法。方 法 采用高效液相色谱法，色谱柱为PhenomenexODS色谱柱 (250nlm×4．6mm，5 m)，流动相为乙腈一水．冰醋酸(30： 70：0．5)，流速 1．0mL·min一，柱温25℃ ，检测波结果 肉桂酸在0．01021—0．10210txg范围内线性关系 良好 (r：0．9998)，平均回收率为97．8％，RSD=1．01％；桂皮醛在 0．0682～0．6820txg范围内线性关系良好 (r： 0．9997)，平均回收率为98．1％，RSD=0．95％ ；丹皮酚在0．162～1．620 g范围内线性关系良好 (r=0．9996)，平均回 收率为96．4％，RSD：0．85％ (n=6)。结论 该方法准确、简便、快速，可用于枝茯苓方超临界 CO，萃取物的质量控制。 [关键词] 桂枝茯苓方；肉桂酸；桂皮醛；丹皮酚；色谱法，高压液相 [中图分类号] R286；R927．2 [文献标识码] A [文章编号] 1004-0781(2008)12—1512-02 桂枝茯苓方由桂枝、茯苓、牡丹皮等多味中药组成，出 自东 苓方中的桂枝、牡丹皮、赤芍、桃仁药材共 1．4kg混匀，装入5L 汉张仲景的 《金匮要略》，具有活血、化瘀、消瘕之功，用于妇女 萃取釜，按照已经初步建立的萃取工艺条件：萃取压力40MPa、 宿有瘕块，或血瘀经闭、行经腹痛、产后恶露不尽等，是 目前治 萃取温度40℃、解析压力6MPa、解析温度30℃条件下萃取 ， 疗妇科血瘀疾病的首选药。笔者曾采用二氧化碳超临界萃取技 4h后，收得萃取物。 术(SFE—CO：)对桂枝茯苓方中桂枝、牡丹皮、赤芍、桃仁4味药材 2．2 含量测定 进行了混合萃取研究，以二氧化碳萃取物回收率作为指标初步建 2．2．1 色谱条件 色谱柱：PhenomenexODS柱 (250lllln× 立了SFE—CO萃取桂枝茯苓方的工艺条件。但仅以二氧化碳总 4．6lnln，5 m)；流动相：乙腈一水-冰醋酸(3o：70：0．5)；流速 ： 萃取物的回收率为指标进行工艺优选有一定的片面性。笔者在 1．0mL·min。。；柱温：室温；检测波长 ：274ilm；进样量 l0 L。 筛选各种色谱体系的基础上，参阅有关文献” ，采用高效液相 2．2．2 对照品溶液的制备 取 肉桂酸、桂皮醛和丹皮酚对照 色谱(HPLC)法同时测定了桂枝茯苓方超临界二氧化碳萃取物 品适量，加甲醇制成每 1mL含肉桂酸2lag、桂皮醛35 和丹 中肉桂酸、桂皮醛和丹皮酚3种活性成分的含量，操作简便，准确 皮酚 70 混合溶液 ，即得。 度高，重现性好，可全面有效地控制萃取物的质量，为进一步综合 2．2．3 供试品溶液的制备 取萃取物lg，精密称定，置50mL 评价和优化超临界二氧化碳提取工艺奠定基础。 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密吸取 1mL，置 10mL量瓶中， 1 仪器与试药 加甲醇稀释至刻度 ，摇匀，滤过，即得。 FY221—50-06超临界二氧化碳萃取装置 (南通市飞宇石油 2．2．4 阴性对照溶液的制备 按照 “2．1”项下工艺，分别制 科技开发有限公司)；二氧化碳气体 (陕西兴化新科气体有限责