探索psbA-trnH序列对竹茹、天竺黄及其近缘物种的鉴定.pdfVIP

2014 第十六卷 第十一期 Vo1．16No．11 探索psbA—trnH序列对竹茹、天竺黄及其 近缘物种的鉴定六 樊佳佳 ，张婉冰 ，向 丽 ，张雅琴 ，刘 霞 2★★ (1．武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070； 2．中国中医科学院中药研究所 北京 100700) 摘 要：目的：采用psbA—trnH序列对竹茹、天竺黄及其近缘物种进行 DNA条形码鉴定研究，保障临 床用药准确、安全。方法：收集竹茹、天竺黄及其近缘物种共 71份材料 ，提取基因组 DNA、PCR扩增并双 向测序 ，经 CodonCodeAlignerV4．2拼接获得序列，应用 MEGA5．0比对分析，计算种 内及种 间 Kimura一 2一Parameter(K2P)遗传距 离并构建 系统发育树 。结果：竹茹、天竺黄各基原及其近缘物种基于psbA—trnH 序列的种 内最大K2P遗传距 离均小于其与近缘物种 的种间最小 K2P遗传距 离；NJ树 图结合 MEGA 比 对结果显示，基原植物青杆竹与青皮竹之间无法 区分，而竹茹、天竺黄及其他基原物种之间均可较好地 区分并呈现明显的单系性。结论 ：基于psbA—trnH序列可以准确地鉴定多基原药材竹茹、天竺黄及其近 缘物种 。 关键词 ：竹茹 天竺黄 近缘种 psbA—trnH 鉴定 doi：10．11842／wst．2014．11．011 中图分类号 ：R282．5 文献标识码 ：A 竹茹和天竺黄均为 2010版 《中国药典》收载的 中的橘皮竹茹汤[3]，其应用历史悠久 ，历代本草均有 常用多基原 中药材…。竹茹为禾本科植物青秆竹 记载，在 本《草纲 目》中列入 《竹》项下 ，书中记载竹 BambusatuldoidesMunro、大 头 典 竹 Sinocalamuz 类 2O多种 ，称 “人多不能尽别”f41，目前市场上常出 beecheyanus(Munro)McClurevar．pubescensP．F．Li 现 的竹茹 的代用 品为毛竹 Phyllostachyspubescens (Bambusabeecheyanavar．pubescens)或淡竹 一 MazeletH．deLehaie (FloraofChina更名 为 Phyl— lostachysnigra (Lodd．)Munrovar．henonis(Mitf．) lostachysedulis)f51，其他近缘植物如粉单竹 Bambusa StapfexRendle茎秆的干燥 中间层 。天竺黄为禾本 chungii、小叶龙竹 Dendrocalamusbarbatus、麻竹 Den— 科植物青皮竹 BambusatextilisMcClure或华思劳竹 drocalamuslatiflorus等也常与竹茹 、天竺黄基原植物 SchizostachyumchineseRendle等秆内分泌液干燥后 混淆 ，更值得注意的是，竹茹 、天竺黄两者之间在药 的块状物Il1。这两种药材的基原植物在我 国分布广 ， 材来源方面也容易混用 。形态学上难 以将其区分 ， 面积大 ，药用价值和经济价值高，在药材市场上的 且 目前传统的显微 、紫外和薄层等鉴定方法均有一 需求量 日趋增大l21。竹茹始载于张仲景 《金匮要略》 定难度和缺陷，易造成混用而影响用药安全。因此 ， 急需一种快捷准确的方法对其进行鉴定 ，为其用药 收稿 日期 ：2014—11-05 安全和疗效提供有力保障。 修回 日期：2014—11-18 ★ 科学技术部 国家重大科技专项(2014ZX09304—307—001—020)：中药新药安全性检测技术与标准研 究—— 中药原料药混伪品分子基因鉴定 技术与标准，主课题 负责人：肖红斌，子课题 负责人：刘霞；武汉理工大学 自主创新研究基金本科生项 目(2014一HG—B1—07)：苗药金铁锁提 取工艺研究，负责人 ：张婉冰。 ★★ 通讯作者：刘霞，博士，副教授 ，主要研究方向：中药资源与分子鉴定。 2349 [W