关于Warthin-Starry染色及应用介绍及体会.pdfVIP

2009年全国病理学技术进展和应用研讨会 关于Warthin-Starry染色的应用介绍及体会 004 陈昱罗添友唐怡唐源(华西医院病理科611) 目fji『基冈染色体技术、分了生物学技术、生物化学技术等研究方法已渗透到符个临床诊断病理领 域，但许多传统的特殊染色法仍是显示病原体、组织及细胞内特殊结构的简便且可靠的方法。其中， 体表面的粘蛋白与银的结合。下面我们就该方法的主要环节及综合应用作简要介绍。 l、试剂配制及染色方法 um。 1．1切片准备：常规石蜡切片4 明胶液允分混匀)。 观察组织旱浅棕黄色，同时显色剂变成棕黑色即可中止显色，显色时问以不同的组织而定。用54℃热自 来水冲洗终I卜显色；脱水，透明，封片。 2．弘S法的廊用 W-S法除可显示螺旋体外还可显示放线菌、猫抓病球杆菌、尘埃颗粒、胃幽门螺杆菌、黑色素颗粒、真 菌、球菌及神经纤维等。 2．1放线菌 放线菌是革兰阳性丝状杆菌，是引起放线菌病的病原体。肉眼观察可见特异性物质硫磺颗粒。检杏常 察困难， 易漏诊；Grocott六胺银染色效果好，背景清晰，对比鲜明，但方法繁琐耗时；PAS染色的组织细胞 被染成红色，难与真菌孢了鉴别；而w—S法更能突出组织内所浸润的真菌菌丝和孢了细菌，与组织对比 度强，易观察，准确率高。用w-S银染法联合HE染色、六胺银法及PAS染色等方法可更苴观显示病原体， 提高放线菌病的诊断正确率，减少共全避免误诊。 2．2螺旋体 W-S法首先就是应用于显示梅毒螺旋体(treponema 是一群细长、柔切、弯曲早．螺旋状的原核细胞微生物，特性介于细菌与原虫之间。冈为它的折光性低， 故用一般染料一i易着色，山于其病原菌含有黏多糖和蛋白，在一定温度下能吸附硝酸银中的银离了，再 经过显色剂作用使银离了被还原为金属银，在高倍显微镜下能畲见，其硅色为棕黑色。W-S法的显色是 垒关重要的一步，若显色4i够，螺旋体及背景早．灰黄色，彳i易观察；若显色过度，背景较深，银颗粒 沉淀附着，螺旋体显粗黑色，波浪状则4i明显。 2．3吞I噬细胞内尘粒 矽肺或硅肺可引起肺部组织的广泛病变。W—S染色法可刈州『b、脾、淋巴结内的吞噬细胞内尘粒进行 2009年全国病理学技术进展和应用研讨会 染色，并且染色效果优于传统的HE染色。w—S染色／fi仅可以看到各种较大的尘细胞，还可以看到HE 染色切片中难以被辨认的细小颗粒，尤其是在矽结节中浓密分布着的细小颗粒亦能被显示出来，颗粒 早黑色，与HE染色切片形成鲜明埘比。联合免疫组化方法检测CD68，可判断尘肺的组织学来源，其 判断尘肺的类型，并可判断组织内的微小尘肺病变，对尘肿病变的可能性具有提示作用。 ScratchDi 2．4猫抓病(Cat sease，CSD) 病病原体巴通(Bar—tonellahenselae，卧)杆菌。目前，多数学者认为汉赛巴通体是该病的致病原。汉 赛巴通体为纤细、多形态的棒状小杆菌，W—S染色阳性，早|黑色细颗粒状。用于该病的诊断方法有影像 学，血清学，分了生物学等丁．段。但是病理活检仍然是该病诊断最卣接、最有效的方法之一。W-S染色 阳性杆菌，多为B．henselaeI型或II喇，银／1i均匀沉积在杆菌的包膜上，使包膜增厚成颗粒状或球状沉 积，杆菌常见于坏死组织剧边或犯小血管肇。W—S染色可将CSD与结核等肉芽肿l又：别丌来，在W-S染色 中台见病原菌是CSD最可靠的诊断依据。 2．5幽门螺杆菌(HelicobacterPylori，HP) 幽门螺杆菌是慢性活动性胃炎、消化性溃疡重要的致病冈了。检测HP的方法有快速尿素酶(RUT)法、 中，山于HP具有嗜银性，W—S染色是HP较传统及经典的检测方法。义献报道，特异度山高及低依次为 IgG检测则较低。同时W—S法可根据菌景的多少估计病情的严重程度，并分辨HP菌体形态、大小的 不同，具有较强的科研参考价值。 3、染色体会 根据U常的实践T作我们有以下体会：①硝酸银溶液必须用双蒸水眦制，从而避免自来水中含有的 少罩c卜与硝酸银发生反应产生白色沉淀。②室温下的显乜时I’日J应严格控制，一般在5、15内显色。③终 止显色时宜先用54℃左右的热自来水把显色液冲洗干净，以避免显色液中的明胶遇冷