开菲尔粒中降胆固醇乳酸菌的筛选及鉴定.pdfVIP

开菲尔粒中降胆固醇乳酸菌的筛选及鉴定 许女张玢王艳萍 (天津科技大学食品工程与生物技术学院天津市食品营养与安全重点实验室 天津300457) 血清中的高胆固醇含量被认为是诱发动脉粥样硬化、高血压、冠心病等众多心血管 疾病的重要因素，因此，降低食品和人体血清中的胆固醇含量尤为重要。研究证实，服 用某些益生乳酸菌及其相关制品具有降低血清胆固醇的功效。开菲尔粒是一个复杂的微 生物共生体系，主要包括乳酸菌、酵母菌和醋酸菌，其中以乳酸菌的数量和种类最多， 并且是在开菲尔粒发酵中起主要作用的微生物。本研究对西藏开菲尔粒，经MRS矛UMl7 固体培养基分离纯化，得到单菌落，其中11株经镜检，革兰氏染色，过氧化氢酶试验， 初步鉴定为乳酸菌，进一步采用添加了胆固醇的MRS培养基，对其降胆固醇活性进行研 究，结果表明有10株菌在胆固醇的添加浓度为0．03％，37℃厌氧培养24h后，都具有不同 程度的降胆固醇的能力。其中，菌株F5，MA2和F4具有相对较高的降胆固醇能力，其降 解率分别为48％，40％和30％。对此三株菌株进行了形态学、硝酸盐还原，产硫化氢，明 发酵产酸试验，结果显示这三株菌均为兼性厌氧菌，革兰氏染色阳性，过氧化氢酶试验 阴性，硝酸盐还原试验阴性，明胶液化试验阴性，不运动，不产硫化氢，在15。C下生长， 45℃下不生长，在pH9．2和pH4．8下均能生长，均能耐受6．5％NaCl，能发酵利用葡萄 糖、乳糖、半乳糖、麦芽糖、果糖、核糖、蜜二糖、甘露糖、蔗糖海、藻糖、阿拉伯糖、 木糖、甘露醇、山梨醇、棉籽糖、七叶苷，而不能发酵利用鼠李糖。综合其形态学及生 理生化特性，参照《伯杰氏细菌鉴定手册》，确定这三株菌均为植物乳杆菌。再利用细 菌核糖体16SrRNA基因的通用引物，对这三株菌经基因组提取，PCR扩增目的片段，电泳， 回收，测序，及BLAST同源比对，系统进化树构建，结果发现，这三株菌都扩增出1500bp Lactobacillus 杆菌。另外对这三株菌的耐酸，耐胆盐，牛乳发酵等性能作了研究，结果显示此三株菌 都从108下降到107，说明这三株菌都具有良好的耐酸和耐胆盐特性，进入人体后，能抵 抗胃酸对菌体的灭活作用，顺利地到达肠道，发挥其降胆固醇等生理功能。 牛乳发酵 试验结果为，MA2，F4凝乳时间为12h，具备良好的酸奶风味，凝乳质地均匀，具有优良 发酵性能，而F5凝乳时间为48h，虽然凝乳时间长，但将其与另外一种酸奶菌株混合使 用，则凝乳时间缩短，且风味，质地良好，且鉴于实验室前期研究还发现F5具有较高的 EPS产量，因而具有开发降胆固醇及具有EPS产生菌生理功能(抗癌，抗肿瘤，抗疲劳) 发酵剂的潜力。目前，国外并没有报道从开菲尔粒中筛选纯种的降胆固醇乳酸菌，只是 对开菲尔粒整体的降胆固醇性能作了研究，而国内，有学者也曾从开菲尔粒中筛选出降 胆固醇的乳酸菌，并且经实验证明为干酪乳杆菌，降解率为32％，但是大部分采用的筛 选培养基都是添加了胆盐的胆固醇MRS培养基，利用的是乳酸菌降胆固醇的共沉淀机理， 即乳酸菌乳酸菌产生胆盐水解酶，将结合态胆盐转变为游离态胆盐，后者溶解度下降与 胆同醇发生共沉淀，且降解后的生成的游离胆盐，在肠道的溶解度和被吸收能力均比结 合态胆盐差，以粪便的形式排出体外，由此导致了生成胆盐的前体物质一胆固醇的代谢 加速，达到降低血清胆固醇水平的效果。而本试验用的筛选培养基并没有加胆盐，利用 的是乳酸菌菌体直接吸附，同化吸收胆固醇的机理，为深入揭示开菲尔的功能及其生态 学奠定了基础。 作者简介：王艳萍，通讯作者，教授，食品微生物专业，电子邮箱：ypwang@tust．edu．cn；许女， 在读博士，生物技术与食品工程专业，电子邮箱：xunv．_2004@163．corn 黄姜皂素废水用于红薯干生产酒精的工艺研究 龚美珍龚大春 (三峡大学化学与生命科学学院艾伦·麦克德尔米德再生能源研究所 宜昌443001) 薯蓣植物黄姜(Yam)，为盾叶薯蓣(DioscoreazingiberensisC·H·Wright)的根 茎，是我国特有的用于生产甾体激素前体薯蓣皂甙元(Diosgenin)的药源植物。黄姜 皂素废水是强酸性高浓度有机废水，富含黄姜淀粉水解成的糖类。废水的直接排放严 重污染了附近的水源、影响了水质，其环境污染问题已经制约了皂素产业的发展。黄 姜皂素一次水解废水还原糖含量约为4％一5％，直接发酵生产工业酒精，酒精产量在3％ 左右，这样的酒