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高温对白僵菌分生孢子萌发和生长的影响
谭云峰 杨敏芝
(吉林省农业科学院农业资源与环境研究中心,公主岭,136100)
摘要:试验研究了2株白僵菌在持续高温处理下的分生孢子萌发和生长。结果表明:高温对
白僵菌孢子的生活力有很大影响,温度越高,孢子的萌发率越低。35。C处理对孢子影响最小,
40.-50‘C是孢子的敏感区,孢子的萌发随温度和时间而变化,50C处理,孢子的萌发率直线
下降,96hr后孢子无萌发。60C处理,孢子失去活力。
关键词:白僵菌;分生孢子;高温;影响
白僵菌(Beauveria)是一种寄生谱很广的昆虫病原菌,因其杀虫效果
好、不伤害天敌、不污染环境,在我国北方用于防治亚洲玉米螟
的影响,其中温度是其重要的影响因素之一。白僵菌制剂在生产、运输、存放和
田间应用时,经常会遇到高温的环境。高温对白僵菌孢子的耐受力有影响,不同
菌株的耐受力有所不同‘1’。研究高温对白僵菌分生孢子活力的影响对于指导白僵
菌剂型加工、贮存运输以及田间应用技术均有指导意义。本文研究了玉米螟白僵
菌2个生产应用菌株在不同温度的高温处理下其分生孢子萌发及生长的变化并
进行评价。
l、材料与方法
1.1供试菌株:本室选育的玉米螟球孢白僵菌9。菌株和筛选保存的白僵菌GS-18
菌株。
1.2供试菌剂:以添加1%蛋白胨的PDA为培养基(简写为PPDA),将斜面菌种转接
到茄形瓶中,25℃培养10-15天,孢子成熟后收集下来,置于4C冰箱待用。
1.4处理时间:o_-24011r。
1.5试验方法:
(1)取培养好的分生孢子粉,用0.2%吐温80无菌水制成不同浓度的孢子悬浮
液。取一定浓度的菌液用滴管在载玻片上滴两滴,在室温下使菌液自然干,将滴
加菌液的载玻片分别放入已设定好不同温度的培养箱中,定时取出载玻片,然后
滴加两滴PDA+O.3%蛋白胨培养液到菌液处,置于底部有湿泡沫9cm培养皿中,
于25C下培养,24小时后取出在显微镜下观察5—10个视野,约500个孢子,计萌
发率。
(2)分别称取一定量的分生孢子粉,置于5cm的培养皿内,然后分别放入不同
温度的培养箱中,定时取样,配制成不同浓度的分生孢子悬浮液,然后分别用载
玻片方法计孢子萌发率和涂布于PDA平板培养基于26。C培养4天计成菌落数。
2、结果与分析
2.1不同温度对白僵菌分生孢子萌发的影响
在载玻片的试验中发现,温度越高孢子的萌发率越低。60。C处理,孢
子失去活性不萌发。经过对试验数据统计分析,试验中的两个菌株之间对高温的
影响差异不显著。
在30℃一50℃条件下,白僵菌分生孢子的萌发差异很大(表1)。35
表1 GS-18菌株分生孢予在不同温度处理下的萌发率
℃处理,144hr前,孢子校正萌发率在85%以上,144hr后,孢子萌发率逐渐下
降,在240hr时,萌发率下降到70.0%左右,可见,35。C温度对白僵菌孢子萌
发短期内影响很小。40℃处理,48hr前,孢子萌发变化不大,萌发率在85%以上,
48hr后,随着时间的增长,萌发率逐渐下降,240hr时,萌发率降到50%,此温
度对分生孢子的萌发影响加大。45℃处理,48hr前孢子萌发变化不大,48Hr后,
萌发率快速下降,168hr时,孢子不萌发。50℃处理条件下,分生孢子的萌发率
随着时间的增加而直线下降,60hr时萌发率下降到50%,96hr时孢子基本不萌
发。可见,45℃和50℃的温度对分生孢子萌发影响很大,孢子的萌发对此温度
‘
相当敏感。 .
在分生孢子粉的试验中,温度对分生孢子萌发和生长的影响比载玻片方法要
速下降,24hr时,几乎全不发芽;45℃以上处理,孢子短时间内就丧失活力。
本试验中,平皿上成菌落数比发芽率低。从以前的试验经验得知,载玻片方法测
发芽率比用摇瓶培养测发芽率结果偏低,因此,本试验的试验结果可能偏低。
两种方式处理白僵菌孢子的结果有一定的差异,但总的趋势一致,处理温
度和孢子的萌发率成反比。载玻片方法中温度对孢子的萌发好于直接处理孢子
粉,可能是由于加入吐温的结果。
2.2不同温度对白僵菌生长的影响
白僵菌在不同的温度下孢子的萌发、’菌丝生长和产孢表现不同。35℃处理,
孢子的萌发、菌丝生长和产孢和对照比差异不大。。40。C、45C处理,孢子萌发所
需的时间比对照时间长,一菌丝生长变
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