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传染性喉气管炎
管炎病毒特异性抗体检测的ELISA抗原而用于病
2结果与分析 毒感染的监测，并为进一步研究gE基因缺失的标
2．1重组表达载体的构建PCR扩增出约0．7kb的记疫苗奠定基础。
特异性片段，与预计的大小相符。重组质粒pET—
参考文献
pgE用EcoRI和XhoI酶切鉴定，得到5．9kb和0．
E13B．W．Calnek(美)主编，高福，苏敬良主译，禽病学(第十版)
7kb大小的片段，PCR也鉴定出约0．7kb片段，测
’ [M]，北京：中国农业出版社，1999：674—690．
序结果表明，pET--pgE所表达片段与实验设计一
Veits，D?rteLnschow，KatharinaKindermann，eta1．，
[2]Jutta
致。
Deletionofthenon——essentialULO otinfectious
gene
2．2SDS—PAGE与Westernblot分析SDS— leadstoattenuationinchickens，
laryngotracheitis(ILT)virus
andULOmutants influenzavirus
PAGE分析(图1)表明，pET—pgE在BL21中表expressing haemagglutinin
ILTandfowl
达，所得融合蛋白r—pgE的分子量大小约为50kD，(H7)protectagainst plague．J．Gen．Vir01．，
2003，8413343—3352．
与预测的分子量大小一致。薄层扫描表明f—pgE
Laschow，OrtrudWerner，ThomasC．Mettenleiter，et
I-3]I菇rte
占菌体蛋白总量的62．3％，且以包涵体和可溶形式
a1．，ProtectionofchickensfromlethalavianinfluenzaAvirus
同时表达。Westernblot检测结果(图2)显示，融合 infectionlive—virusvaccinationwithinfectious
by
virusreeombinants the
蛋白r—pgE能与鸡传染性喉气管炎阳性血清反 laryngotracheitis expressing
应，产生大小约为50kD的特异条带。说明融合蛋白 s 4249—
r—pgE至少保留了部分抗原性，可作为传染性喉气 4259．
鸡传染性喉气管炎基因工程疫苗的研究进展
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