HPLC方法开发课件.pptVIP

系统方法开发 开发方法之前应明确以下各项 分离目的 样品性质和需要的预处理 检测方法 开发分离方法的步骤 选择合适的HPLC方法 开始建立方法 改善分离 检查问题 完善方法 有关样品组分和性质的重要信息 现有组分的数目 组分的结构以及具有的官能团 组分的分子量 组分的pKa 值 样品基质的性质：溶剂, 填充物等 要检测组分在样品中的浓度范围 样品溶解度 分离目的 是分析还是回收样品组分？ 是否以知样品所有成分的化学特性，即是否需要定性分析？ 是否需要解析出样品的所有成分 (例如, 对映异构体, 非对映异构体, 同系物, 低聚物, 痕量杂物…)? 如需定量分析，需要多高的精密度？ 分离目的 本法需用于几种样品剂型(如原料,制剂, 环保样品等) ？ 未来使用该方法分析的样品数的多少？ 未来使用该方法的实验室拥有的HPLC设备 和技术能力？ 样品的性质以及是否要进行预处理 来自不同形态的样品: 可以直接进样的溶液 需要稀释，缓冲，或者加入第二种溶剂的溶液 能溶解在流动相中的固体物 – 配制样品前应称重 含有能引起柱效损失的物质的样品- 要求萃取或过滤 被分析物中含有不溶物- 要求萃取或过滤 检测方式 根据不同的分离目的需要不同的检测器. 测量单个或少量的化合物时, 理想的检测器应该仅仅对目标物有响应而对其他物质没有响应 – 高选择性和高灵敏度 对于定性分析和制备色谱, 理想的检测器是通用