酶制剂工艺学论文.docVIP

α-淀粉酶的生产及其分离纯化 摘 要 α-淀粉酶 生产：以枯草芽孢杆菌14140为出发菌株,经亚硝基胍反复多次处理和筛选生产α-淀粉酶。 分离纯化： 以CTAB/正丁醇/异辛烷构成反胶团系统,通过反胶团萃取方式纯化精制α-淀粉酶。最佳反应条件为:萃取温度40℃,水相组成为NaCl0. 03 mol/L, pH 12. 0,有机相∶无机相=1∶2,振荡时间10 min;反萃取最佳条件为:温度60℃,水相组成为KCl3 mol/L, pH 4. 0,有机相∶无机相=2∶1,反萃取振荡时间10 min。在上述条件下,经过一个萃取与反萃取循环后,α-淀粉酶的萃取率最高可达90. 78%。关键词 α-淀粉酶 枯草芽胞杆菌 亚硝基胍诱变处理 分离纯化 反胶团萃取 α-淀粉酶是一种催化淀粉水解成为糊精的淀粉水解酶,分布广泛,从微生物到高等植物均可见到。近年来,随着淀粉原料深加工工业的发展、工艺条件的改变,对α-淀粉酶的要求更为严格,需要质量好、纯度高、活力大的酶制剂 α-淀粉酶是一种重要的工业酶制剂产品.枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)是其主要生产菌种之一.大部分α-淀粉酶经微生物发酵后,分泌到培养介质中,属胞外酶类.在α-淀粉酶生产过程中,至少受到两种基因调控[1~5],一种是酶合成调控系统,另一种是酶分泌的调控系统.选育α-淀粉酶