卵泡大小及培养方式对山羊卵母细胞体外培养的影响.pdfVIP

32 中国兽医杂志 2008年(第 44卷)第 11期 卵泡大小及培养方式对山羊卵母细胞体外培养的影响 许 杰 ，马恒 东 (1．滨州职业学院生物工程系，山东 滨州 256603；2．四川农业大学动物科技学院，四川 雅安 625014) 中图分类号：s814．8 文献标识码 ：B 文章编号：0529—6005(2008)11-0032—02 在体 内，卵母细胞是在卵泡 内发育成熟的，卵泡 破法，在实体显微镜下收集卵丘一卵母细胞复合体 大小对卵母细胞的成熟及受精后发育潜力起着至关 (cumulusoocyteseomlexs，COCs)。 重要的作用。受精卵体外培养过程中，培养微滴 的 1．3 体外成熟培养 (invitromaturation，IVM) 大小 、微滴中受精卵的数量都对受精卵的发育产生 COCs用基础培养液清洗两次 ，成熟培养液清洗两 较为重要的影响。本试验研究了卵泡直径与培养微 次后，移入 50 L。成熟培养液微滴 中培养 27h 滴对山羊卵母细胞体外成熟培养 (invitromatura— (10～15枚 卵母细胞 ／滴)。培养条件为：39℃或 tion，IVM)、胚胎体外培养 (invitroculture，IVC) 38．5℃ ，5 CO。，饱和湿度 (下同)。 的影响，以期提高体外生产胚胎的水平。 2 结果 1 材料与方法 2．1 不同直径有腔卵泡卵母细胞的比较 本试验 1．1 卵巢的采集 本试验所用 的卵母细胞是从四 将卵泡分为3类 ，结果见表 1。大卵泡得到 的卵母 川农业大学附近的屠宰场和个体屠宰户采集卵巢得 细胞成熟率极显著 的高于中等卵泡和小 卵泡的卵 到。得到山羊卵巢后 ，立即投入 37．0℃～39．0~C含 母细胞成熟率 (P0．01)，中等卵泡得到的卵母细 有双抗 (青霉素 200IU／mL、链霉素 200~／g／mL)的 胞成熟率显著 高于小卵泡 的卵母细胞成熟率 灭菌生理盐水中，1～2h内送 回实验室。将卵巢用 (PO．05)；3种 卵泡 的卵母细胞 体 外受精 (in 37℃灭菌生理盐水洗 3次。体外受精用的精液购 自 vitrofertilization，IVF)后，中等卵泡 的卵裂率显著 四川省冻精 总站 的颗粒冻精 ，解冻后活力大于 高于小卵泡和大卵泡 ，小卵泡与大卵泡之 间差异 3O ，获能后使用。 不显著 。 1．2 卵巢卵母细胞的收集 将卵巢处理后 ，采用刺 2．2 培养方式对受精卵发育的影响 本试验采用 不同的培养液体积 1O枚 ／30 L、1O枚 ／40 L、10 收稿 日期：2007—04—28 枚 ／5o L培养山羊受精卵，结果见表 2。10枚 ／30 基金项 目：四川省教育厅重点项 目资助 (2003A016) 作者简介：许杰 (1979)，女，助教，硕士，主要从事生殖生理与胚 L的卵裂数要高于 1O枚 ／40FL、10枚 ／50 L的培 胎工程 的研究 养结果 。 品肉鸡后期饲料中黄曲霉毒素B 的含量 ，控制其对 [3]杨骁飞余·冰，陈代文，等．2006年四川地区饲料原料霉菌毒素 ND疫苗免疫抑制造成的影响。