质粒介导的AmpCβ内酰胺酶的分型及分型技术.pdfVIP

质粒介导的AmpC B内酰胺酶的分型及分型技术 天津公安医院检验科(300050)路秀文王金良 肠杆菌科及其他革兰阴性细菌产生的质粒介导 的AmpCp内酰胺酶不同于染色体上的AmpC酶，它于阴沟肠杆菌)。 不是通过诱导机制产酶，而是由质粒携带和编码，常 质粒XmpC酶的分型对流行病学调查，控制流 同时携带其他耐药基因，而致多重耐药，且传播很 行菌株有重要意义。此类酶以CMY-2最为常见，全 快。它来源于几种肠杆菌科细菌的染色体AmpC基球均有存在。美国报告较多，在沙门菌等中可有暴 因，如阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、摩根摩根菌、 发流行。在法国多为ACE酶。分型应在其表型特 蜂房哈夫尼亚菌等。 征的基础上通过检测酶特性和酶基因来确定。 具此酶的细菌常与膜通透性耐药同时存在，使 三、质粒AmpC酶的表型特征 碳青霉烯类耐药，如在纽约暴发流行的肺炎克雷伯 产此类酶的细菌感染者多在接受三代头孢、头 菌等。 孢西丁、头孢替坦或亚胺培南数日后不见效，感染菌 仍为同一菌。患者多为术后、肿瘤、白血病、免疫力、 自20世纪80年代后期，质粒AmpC酶以每年 增加1～2种的速度在扩展，目前约有29种。 低下、移植术后。感染菌的标本来自分泌物、脓汁、 一、质粒AmpC酶的发现史 血液、尿液、痰、粪便等。 1976年Bobrowski报告了奇异变形杆菌的类似此类酶的表型特征为对青霉素、新型青霉素、三 酶，但质粒丢失。1989年Bauemfield等报告自韩国代头孢、头霉素均耐药。对头孢匹肟，头孢匹罗敏感， 分离的肺炎克雷伯菌，可将对头孢西丁、头孢替坦以 但程度不一。对亚胺培南、美罗培南敏感。一般头孢 及青霉素等的耐药转移给大肠埃希菌，因其具头霉 他啶的MIC高于头孢噻肟，头孢西丁高于头孢替坦。 此类酶可被邻氯西林抑制。新的更好的抑制剂 素酶的特点，依Cephamyc诅而命名为CMY-1，其pI 为8．0，易被舒巴坦抑制，提示为AmpC酶。1993年 Knothe报告了耐头孢西丁的黏质沙雷菌，并转移给用这些表型特征可以用头孢西丁敏感试验，邻(氟) 氯西林双抑制剂协同试验，提取粗酶的三维试验来 变形杆菌和沙门菌。第1位证明质粒携带AmpC酶 并转移成功的是Papanecolaou，该酶名为MIR-1，与大作表型的检测。但现在还没有推荐方法，上述方法 肠埃希菌有90％的同源性。 其后发现的质粒AmpC酶多依所耐的重要抗生型别，而且常不可靠。如具ACC酶的大肠埃希菌可 素而命名，如耐Cefocitin的FOX，耐Moxalactam的耐头孢他啶，但对头孢西丁和头孢替坦敏感。具 MOX，耐Latamocef的LAT；也有依酶分类命名，如DHA-2酶的肠杆菌对头孢西丁是中介，而对头孢他 Class C(ACC)；也有依发现啶、头孢噻肟敏感。少数酶会被他唑巴坦所抑制。 AmpCType(ACT)，Amblor 地命名，如发现于Mirium医院的MIR-1，发现于沙特因此，型别鉴定要靠检测其酶学特征和酶基因。 阿拉伯Dhahran医院的DHA。也有依患者的名字而 四、质粒AmpC酶的酶学特征 命名的，如患者Bihl(Bm)等。Barlow和Hall分析酶1．提取酶测等电点：质粒AmpC酶的p1分布很 的氨基酸序列，发现CMY-2，BIL-2，LAT-2为同一酶， 广，从6．4—9．4，有些FOX酶在作等电聚焦电泳时 LAT-1，I。AT4也是一种，LAT-3，CMY-6也是一种。可出现数条带。可同时作邻氯西礼貌抑制试验。 为与原名相衔接，用括号表示，如