实验八微生物数量的测定――――显微镜直接计数法.docVIP

实验八 微生物数量的测定――――显微镜直接计数法 一 目的要求二原理 血球计数板是一块特制的厚载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个方格网(图Ⅳ-2)。每个方格网共分9大格，其中间的一大格(又称为计数室)常被用作微生物的计数。计数室的刻度有两种：一种是大方格分为16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即每个大方格都由400个小方格组成(图5)。 每个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm2，每个小方格的面积为1／400mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与计数室底部之间的高度为0.1mm，所以每个计数室(大方格)的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为l／4000mm3。使用血球计数板直接计数时，先要测定每个小方格(或中方格)中微生物的数量，再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。 图Ⅳ-2 血球计数板的构造 a.平面图(中间平台分为两半，各刻有一个方格网) b.侧面图(中间平台与盖玻片之间有高度为0.1毫米的间隙) 图Ⅳ-3 血球计数板计数网的分区和分格 三 1、菌种：酿酒酵母； 2、血球计数板，显微镜，盖玻片，无菌毛细滴管； 3、菌种：大肠杆菌菌悬液。 4、1ml无菌吸管，无菌 平皿，无菌水，试管，恒温培养箱 牛肉膏蛋白胨培养基。 四 实验内容与步骤五 实验报告