两种关键信号转导通路活性状态与K562细胞对DNR、Ara-C敏感性的关系.pdfVIP

山东医药2012年第52卷筮 Q 两种关键信号转导通路活性状态与 K562细胞 对 DNR、Ara—C敏感性的关系 曾意茹 。陈福雄，李华梅 ，卢慧敏 。吴泽霖 (广州医学院第一附属医院，广州510120) 摘要 ：目的 观察两种关键信号转导通路的活性状态与白血病细胞株 K562对柔红霉素 (DNR)、阿糖胞苷 (Ara．C)的敏感性的关系。方法 将 K562细胞分为5个组，经U0126、LY294002、雷帕霉素处理的细胞分别为抑制 剂A、B、C组 ，经佛波酯 (PMA)刺激的细胞为激活剂组，未作处理者为对照组。采用磷酸化流式细胞术检测细胞中 的p-AktT308、p-Akt$473及p-ERK1／2。将各组细胞分别与DNR、Ara-C作用48h，采用 AnnexinV／PI标记法检测 细胞凋亡率。结果 抑制剂A组p-ERK1／2表达及抑制剂B组p-ERK1／2、p-AktT308、p-Akt$473表达均低于对照 组(P均0．05)；激活剂组 p-ERK1／2、p-Akt$473表达高于对照组 (P均0．05)；抑制剂 C组p-ERK1／2、p-Akt T308、p-Akt$473表达及激活剂组p-AktT308与对照组相近(P均0．05)。DNR和Ara—C作用后激活剂组细胞凋 亡率均低于对照组(P均0．05)。DNR作用后，抑制剂A、B、c组细胞凋亡率均高于对照组 (P均0．05)；Ara—C 作用后，抑制剂 B、c组的细胞凋亡率高于对照组 (P均 0．05)，抑制剂A组与对照组凋亡率无显著差异 (P 0．05)。结论 在信号转导通路激活状态下，K562对 DNR、Ara—C的敏感性降低，抑制 Ras／PI3K／m N／Ak nlT0R 通路能增强K562对 DNR、Ara．C的敏感性，Ras／Ra￡／MEK／ERK通路激活可能与 DNR耐药有关，但抑制该通路对 Ara-c诱导的K562细胞凋亡无直接作用。 关键词：信号转导通路；磷酸化信号蛋 白；药物疗法；柔红霉素；阿糖胞苷；细胞凋亡；白血病 中图分类号：R725．5 文献标志码：A 文章编号：1002-266X(2012)30-0019-03 ResearchforsensitivityofK562celllinetothechemotherapeuticdrugsundertwokey signaltransductionpathwaysofdifferentactivitystatus ZENG Yi—m ，CHEN Fu—xiong，LIHua—me，LU Hui—min，删 ze．Z (FirstAffiliatedHospital，GuangzhouMedicalCollege，Guangzhou510120，P．R．China) Abstract：Objective ToobservethesensivityofK562celllinestoDNRandAra—Cundertwokeysignaltransduction pathwaysofdifferentactivitystatus．M ethods K562 cellsweredividedintofivegroups．InhibitorgroupsA，B，C were treatedwithU0126，LY294002，rapamycin，respectively．Activatorgroupwastreatedwithphorbol(PMA)．Cellswithout anystimulateconsideredascontrolgroup．Adaptphospho—specificflowe~ometq toanalysetheexpressionofAktT308、Akt $473andERK1／2．Eachgroupofcellsincubatedwith DNR and Ara—C respectivelyfor48 hours．Theapoptosisrateof K562cellsweredetectedbyAnnexinV／PI．Expressionofp-ERK1／2ofgroupA nadp-ERK1／2，p-AktT308，p-Akt$473 ofgroupBwerelowerthna controlgroup(allP0．05)．Theexpressionofp-