细胞吞噬活动的观察.pptVIP

实验八 细胞吞噬活动的观察 实验目的 （1）通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的实验，了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功能。 （2）了解吞噬在机体非特异免疫中的重要作用。 实验原理 高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞，具有吞噬的功能。当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又具有趋化性，它通过产生活跃的变形运动，主动向病原体和异物移行聚集，首先把异物吸附在细胞表面，随之，吸附区域的细胞膜向内凹陷，伸出伪足包围异物，并吞入胞质，形成吞噬泡，继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合，形成吞噬溶酶体，把 病原体杀死，异物消化分解。 实验用品和材料 （一）仪器、用具 显微镜、高压灭菌锅、解剖盘、解剖剪、1ml注射器、吸管、载玻片、盖玻片 （二）材料 小鼠（体重20g左右），鸡血 （三）试剂 6％淀粉肉汤（含0.3％台盼蓝） 方法与步骤 1．实验前2天，每天给小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤（含台盼蓝）1ml。 2．实验时，再往腹腔内注射1ml 1％鸡红细胞悬液，并轻揉腹部，使鸡红细胞悬液分散。 3．20～30ｍin后，用脊椎脱臼法处死小鼠（右手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指与食指同时按住鼠头，使脊髓与脑髓间断开致死）。 4．迅速剖开腹腔，用未装针头的注射器或吸管吸取腹腔液。 5．取一张干净的载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片，显微镜下检查。 观察 在高倍镜下，先分辨清鸡红细胞和巨噬细胞。体积较大圆形或不规则的细胞，其表面有许多似毛刺状的小突起（伪足），胞质中有数量不等的蓝色颗粒（为吞入的含台盼蓝淀粉肉汤形成的吞噬泡）即为巨噬细胞。变换视野，仔细观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程。可见有的鸡红细胞（一至多个）紧贴附于巨噬细胞的表面；有的巨噬细胞已将1至数个红细胞部分吞入；有的巨噬细胞已吞入1个或几个红细胞在胞质中刚刚形成椭圆形的吞噬泡；有的巨噬细胞内的吞噬泡体积缩小，并呈现圆形，这是与初级溶酶体发生融合，泡内物正在被消化分解。 注意事项 1．小鼠腹腔注射时注意不要刺伤内脏。 2．腹腔内的细胞浓度过大，可用生理盐水稀释。 * *