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丹参海藻糖-6-磷酸合成酶基因（SmTPS）的克隆及其表达分析.pdf
基因组学与应用生物学，2014年，第33卷，第2期，第357—364页
GenomicsandAppliedBiology，2014，Vo1．33，No．2，357—364
研究报告
ResearchReport
丹参海藻糖 一6一磷酸合成酶基因(SmTPS)的克隆及其表达分析
岳思思 姚伟 王东浩 陈玉芹 王拮之
药用资源与天然药物化学教育部重点实验室，西北濒危药材资源开发国家工程实验室，陕西师范大学生命科学学院，西安，710062
通讯作者，zzwang@snnu．edu．cn
摘 要 对丹参 EST序列进行Blast分析，得到一条海藻糖 一6一磷酸合成酶(TPS)基因，将其命名为 SmTPS，
GenBank注册号为 JF937196。该基因 eDNA全长 2836bp，包含一个长为 2574bp的ORF，编码 857个氨基
酸 。生物信息学分析表 明，分子量为 97．04kD，等电点为 5．76，含 仅一螺旋、B转角、延伸连和无规则卷 曲。该蛋
白同时具有海藻糖 一6一磷酸合成酶(TPS)~D海藻糖 一6一磷酸磷酸酯酶(TPP)的功能结构域。系统进化树分析
表明丹参TPS功能域和拟南芥AtTPS6属于一类，而 TPP功能域与低等生物酵母 ScTPS2属于一类。实时定
量 PCR结果分析表明，SmTPS基因在丹参不同组织器官中差异表达，其茎中表达量最高。在干旱和低温处理
下，其表达量与对照相比均可上调约2倍，表明SmTPS基因在丹参抵抗干旱和低温胁迫中发挥一定的作用。
关键词 丹参，海藻糖，基因克隆，表达分析
CloningandExpressionAnalysisofTrehalose一6一PSynthaseGene(SmTPS)
inSalviamiltiorrhizaBunge
YueSisi YaoWei W angDonghao ChenYuqin W angZhezhi
KeyLaboratoryoftheMinistry ofEducation forMedicinalResourcesandNaturalPharmaceuticalChemistry，NationalEngineeringLaboratory f0r
ResourceDevelopmentofEndangeredCrudeDrugsinNorthwestofChina，ShaanxiNomr alUniversity，Xi’an710062
Correspondingauthor，zzwnag@snnueducn
DOI：10．13417／j．gab．033．000357
Abstract ByanalyzingEST sequencesofSalviamiltiorrhiza，anew genewhich showedhighsimilaritywith
trehalose一6一Psynthase(TPS)wasclonedandnamedasSm豫 (GenBankaccessionnumber：JF937l96)．Theful1．
1engthcDNA sequenceof5m7 is2836bp long，whichincludesa2574bpopeningreadingflame
， encodesa
857一amino-acid protein．Bioinformaticsanalysisshowed thatmolecularweightofcycloartenolsynthase iS
97．O4kD，theoryisoelectricpointis5．76，includingalphahelix，betatum extendstrandandrandom coil．Amino
，
acidsequenceshowedthatufnctiona1structuredomainsoftrehalose一6一Psynthase(TPS)andtrehalose6一Pphos—
phatasewerepresentinSm ．wepresentphylogeneticanalysesofthetrehalose一6一phosphatesynthase(TPS)
andtrehalose—phosphatase(TPP)domainsandshowthatSm
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