微流控芯片实验室与应用出口：疾病诊断和药物筛选.pdfVIP

大会报告 微流控芯片实验室及其应用出口：疾病诊断 筛选 林炳承秦建华 中国科学院大连化学物理研究所 作者课题组开展微流控芯片实验室研究已有八年，其中第一阶段从事的是基础性的工 作，带有很强的“原始积累”色彩，第二阶段开始考虑应用，包括以应用为导向的基础研究。 前一阶段的工作大体涉及到三个方面。 一、芯片的设计与研制。所涉及的材料有玻璃，石英，高聚物PMMA、PDMS，以及水 凝胶等，不同的材料有不同的制作工艺，也有不同的表面修饰需求。 二、不同检测器的芯片仪的研制。其中包括多台不同类型的激光诱导荧光芯片仪，商品 化的紫外芯片仪，体积很小的电化学芯片仪以及有独特功能的化学发光芯片仪，同时还和香 港大学合作研制了芯片．质谱和芯片一ITP连接界面。 三、常规生物和化学实验室中不同的操作单元在芯片上的构建。已经研制成的芯片上的 单元操作包括：双通道进样、固相萃取、等速电泳、区带电泳、膜分离、亲和色谱分离、酶 反应、免疫反应、细胞培养、分选、裂解、单细胞内涵物分析、单分子检测以及微阀微泵等。 微阀微泵是使其它各个单元操作能在芯片这一微小平台上灵活组合、规模集成，并使整个系 统最终可以被控制的关键。 第二阶段的工作由两个部分组成。 一、以标样为特征的初级应用，也有一些虽然是实际样品，但停留在离线或二、三种操 作的简单集成。已经涉及的对象包括DNA、RNA、蛋白质、肽、氨基酸、手性药物和其他 小分子，也包括SARS、肺癌、高血压、乙肝等疾病的相关标记物及相关基因，此外，还做 了一些分子．分子、分子．细胞相互作用研究。同时，开始把细胞作为对象，研究它的凋亡以 及凋亡引起的细胞内含物的变化。 二、致力于寻求“有杀伤性”的应用，以尽可能发挥芯片实验室规模集成的特点。课题 组现阶段的注意力集中在诊断和筛选两个领域。 诊断的出发点是现场即时，即所谓的PointofCare。其中之一是免疫诊断，已经研制成 一个集成有144个微阀、48个微泵和18个平行分析单元的芯片及相应的免疫分析仪，实现 了体液中IgG的测定，此外，还研制成一套含有5个独立分析单元，每个单元含有7个独立 微阀，可同时进行5种不同样品检测的酶链免疫芯片系统，取得了20个皮质醇实际样品的 测定结果。与此同时，课题组正在构建一个全集成的DNA分析系统，力图把SPE-PCR-CE 过程用微阀微泵连接控制，达到一滴血进入芯片即能读出相关DNA信息的目标。此外，正 以微流控芯片为平台，构建一个医学模型，模拟纳米级的DNA计算机进入机体细胞后，对 与乳腺癌相关的多种基因同时进行计算诊断，并于诊断成立后自动释放药物的过程。 content “杀伤性”应用的第二个对象是高内涵筛选(high screening，HCS)，HCS作为 二级化合物筛选的核心技术，通过监测备选药物对细胞生长、增殖、分化和凋亡等生理过程 的影响，力求在单一实验中获得被筛样品对细胞产生的多维立体生物效应信息。在常规HCS 实验室中，细胞前处理操作仍以基于阵列微孔板的离线方式进行，过程繁冗，耗样量大。相 比之下，微流控芯片有可能成为HCS自动化的理想选择。课题组研制了一种微流控芯片系 统，使整个筛选实验在芯片上以高通量的在线方式连续自动地完成，并以筛选肝癌细胞 (HepG2)和八种凋亡诱导剂为模型对芯片性能进行了验证，该芯片可在一次运行中实现八 种化合物，每种化合物八个浓度条件，每个条件五个实验参数的筛选。除此之外，以液滴包 裹线虫为基本特征的药物筛选研究也在进行之中。 6 微流控芯片实验室进展 参考文献 Lectin Microfluidicfor [1】IntegratedAffinity Chip GlycoforsSeparation Lin XiuliMao,YongLuo,ZlumgpengDai．KeyiWang,Yuguang加．Bingcheng Chemistry76