DNA标记在中药鉴定中应用.pdfVIP

(1，由图I可知t 6种鹿在亲缘关系上依次为梅花鹿、马鹿、白唇鹿、骷鹿、麇鹿和狍于。这一关 系同鹿科动物系统进化的结果是一致的； (2)无论从树状关系，还是遗传分析的结果都能很好地反映出不同鹿种间的亲缘关系，同时也表现 出种内遗传上相对一致性，所以可|三l通过构建RAPD分子标记数据库，并在此基础上进行样品的判别 分析是完全可行的，是RAPD技术真正脆成为中药鉴定手段的有效途径。 (3)在鹿茸鉴定中，实际上前3个引物就已作出了正确的判断，但并非任意几十引物就能作出正确 的结果，关键在于数据库的质量，即首先，数据库中种间多态性应尽可能的丰富}其次，在建库前应做 不同批次的重复实验，尽可能的降低非特异性扩增的影响；建库材料最好选新鲜材料，必尽可能多的包 含扩增信息，因为用DNA降解严重的材料不仅会损失信息，而且对不同来源的待鉴定材料也未必能取 得理想的结果。这一点从图1中13号样品(鹿茸)并未与马鹿的2个样品(鹿血)聚在一起的结果得 到了证明。 叁考文献 [1]自根本，李寡实等．中药RAPD分析鉴定系统盼研建．北京：科学出版社，2001． [2]王宗仁，牡若甫．鹿的桩型与染色体进化．北京：科学出版社．1988．1 ￡3：张朝晖，徐珞珊．我国动物粪药材鉴定研究进展．中国中药杂志，1997．2Z(11) DNA标记在中药鉴定中的应用 郭宝林李家窭 (北索中医药土学北索100029) 抽蔓本丈建议在中药研究中使用“DNA标记”这一术语，简单介绍丁DNA标记的类型t对DNA序列标记、 指纹标记(主要是RAPD)在中药鉴定研究中的应用情况及存在的问题作丁讨论t指出取样策略和结果分析方面应当 日【起重视，列出了DNA标记在运用于中药鉴定的一些局限性。 RAPD 关■词中药鉴定}DNA指纹I DNA标记在中药鉴定领域中正得到越来越广泛的应用。DNA标记指用直接或间接的手段反映研 究对象在DNA序列上的差异，即DNA多态性，在此研究领域，有多种不同的名称被使用，如‘分子 标记…分子遗传标记”、。分子诊断标记”、“DNA分子标记”、“DNA多态性分析”、“DNA分子遗传标 记”、“DNA指纹(分析，技术)”等。作者建议使用。DNA标记”这一名称，以防“分子”一词在中 药中使用引起歧义(不易指明是太分子或小分子)。检测DNA的多态性的方法分为两类，一类是进行 DNA序列测定，给出直接的序列差异，叫DNA序列标记，目前常用的一些通用标记序列有核基因组的 2S b基因等，植物叶绿体基因 rRNA和叫f rRNA基因及其间隔区ITS序列，动物线粒体基因组中的l 组的多个基因及内古子、间隔区{一类是用间接方法反映出序列的差异，又叫DNA指纹标记·DNA标 frag— 记技术更多被用来指后一类．生物学领域现在最常用的指纹标记有基于杂交的RFLP(restriction repeat)·以及基 ments sequence polymorphism，限制性内切酶片段长度多态性)、SSR(simple length amplifiedpolymorphism 于PCR的RAPD(random lenmh SSRtSSR重复序列之间 fragrnentp。lymorphism，扩增的限制性片段长度多态性)、ISSR(inter lengthpolymorphism或简单序列长度多志性)等，本文将探讨 长度多卷性)和SSLP(simplesequenc