中药血清药理学实验方法研究进展.pdfVIP

山东医药2008年第48卷第48期 中药血清药理学实验方法研究进展 郭功玲，李吉华 (山东中医药大学附属医院，山东济南250011) [关键词] 中药复方；药理学，血清；实验方法 [中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1002。266X(2008)48-0116-02 中药复方成分复杂，其细胞分子水平的药理研究受限。 实验结果的干扰 ，优于单次给药 J。中药复方药动力学研究 既往通常将粗提物直接添加于体外细胞培养体系中进行药 亦提示多次反复给药 ，其血药浓度具有持续性。也有研究认 理学观察，但某些非药理干扰难以解决，导致体内、外实验结 为 J，2次给药后采血即可满足实验需要，较 7～10d连续 果和临床疗效不符。以整体动物 口饲灌 胃给药后采集的含 用药简便。 药血清作用于培养细胞的血清药理学方法，客观模拟了药物 2．4 血清标本采集时间 不同功效的中药复方，甚至同一 与机体的相互作用，不但能反映中药 (母体药物)及其可能 复方的不同剂型口服后吸收速率不同，不同机体同一药物的 代谢产物的药理作用，还能反映由药物诱导机体内源性成分 吸收程度各异。所以不同采血时间的含药血清，其有效成分 所产生的作用，结果更具科学性和可信性，现将该法研究进 及含量不一致。因此应考虑复方制剂的功效、剂型和机体状 展综述如下。 态，如有可能须结合药效动力学或中药复方化学成分的药动 1 中药复方制剂的制备 力学参数加以确定。 制备用于细胞培养的中药复方制剂要求较高。以蒸馏 2．5 含药血清添加方式 目前多选择采用同一种属动物。 水煎煮后，有直接采用水煎液，但更多采用水煎醇沉提取液， 在药物添加方式上 ，因不同种属动物血清对细胞增殖等功能 过滤、浓缩、调节pH，并经微孔滤膜或高温除茵，最终制成中 影响不同，已有实验证实 J，培养系中只用同种单一血清既 药原液。 可为细胞提供营养 ，又为药物载体，避免了多种血清的干扰。 2 含药血清的制备 2．6 含药血清处置方式 血清中固有的酶、抗体、补体及其 2．1 给药前禁食 饮食可能影响中药复方体内动力学和临 他生物活性物质 ，对体外培养的细胞、病原微生物和直接用 床疗效。如食物对 口服小柴胡汤者体内甘草甜素、甘草次酸 于体外实验的组织器官是否产生影响将很大程度上干扰实 和黄芩素等的吸收影响明显…。因此应根据中药复方的功 验结果。血清灭活后是否可排除以上干扰 ，或对药效产生正 效特点、实验要求，决定给药前禁食与否，并拟订给药后采血 负影响，仍不完全清楚。已知血清灭活后细胞增殖减弱，可 时间。目前，给药前实验动物多禁食6～12h，不禁水 。 能与血清中细胞生成因子减少有关，有助于减少血清的非药 2．2 给药剂量 以临床等效剂量为基准，注意适当控制药 理性干扰 ，也符合减少微生物感染的常规细胞培养要求 J。 物剂量。计算方法包括临床等效剂量、临床常用量 ×动物等 血清经56℃．30min水浴灭活后，正常血清相对作用强度平 效面积系数 ×培养基内血清稀释度 ，或临床 日用量的5、10、 均降低50％，抑制病毒致病变作用基本消失；含药血清灭活 3O倍 等。对过高剂量 (如临床等效剂量5倍或 10倍等) 后相对作用强度降低程度与给药次数有关 ，一次给药后平均 所得阳性结果，下结论时应慎重或留有余地”。 降低 50％，二次给药后平均降低 35％，但灭活前表现的有效 2．3 给药次数 包括 1次给药 ；2次给药(间隔2h或4 时间点仍存在，不受影响 J。尽管含药血清灭活后抑制病毒 h)；1—2次 ／d，连续 3d ；1次／d，连续 7～10d等。中药复 致病变作用明显降低，但并