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山西医科大学生化讨论课答案 一、DNA复制、RNA合成、蛋白质合成三个过程忠实性的保持。 ⒈DNA复制：①严格的碱基配对 ②DNA聚合酶对碱基的选择 ③复制出错时，即时校读 ④DNA损伤后修复 ⑤DNA复制需要RNA引物。 ⒉RNA合成：①严格的碱基配对 ②RNA聚合酶与启动子结合后才启动转录 ③真核生物不同基因有不同的转录因子，启动特定基因的转录 ④RNA合成后需加工修饰，防止核酸酶的水解 ⒊蛋白质合成：①密码子的简并性,减少基因突变造成的影响 ②mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子的碱基配对 ③氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA的高度特异性 ④氨基酰-tRNA与起始密码子AUG的特异性识别 ⑤mRNA在小亚基上的定位结合（原核→S-D序列，真核→帽结合蛋白复合物） ⑥分子伴侣使肽链正确折叠。 二、1.模板链：下面的一条链。 2.mRNA：5’CGCAGGAUCAGUCGAUGUCCUGUG3’ 3.翻译从起始密码子AUG开始，从5’→3’方向进行。 4.原核细胞 ①存在S-D序列，在起始密码子AUG上游含有AGGA序列。②真核细胞结构基因分为编码区和非编码区，内含子5’端常含GU序列，而此链无。 三、1.过程: ①获取编码动物激素的基因 ②构建基因表达载体 ③将目的基因与载体拼接 ④重组DNA分子导入大肠杆菌 ⑤筛选含目的基因的受体细胞. 2.问题: ①原核表达体系缺乏转录后加工机制 ，不宜表达真核基因组DNA; ②缺乏翻译后加工机制，表达出的真核蛋白质不能适当折叠或糖基化修饰; ③表达的蛋白质常形成不溶性包涵体; ④很难表达出大量的可溶性蛋白. 3.解决方法:构建表达载体时,选择适当的翻译控制序列,合理设计多接头克隆位点. ①在目的基因前连上一个为特殊多肽编码的附加序列，表达融合蛋白 ②在目的基因与附加序列之间加入适当的裂解位点. 五、若某一基因的编码序列中发生一个碱基突变，则该基因的表达产物在结构上会发生的改变有： 1.错配 ①同义突变:突变产生的密码子编码与原来相同的氨基酸，产生相同结构的多肽链。 ②错义突变:突变产生的密码子编码与原来不同的氨基酸，产生不同结构的多肽链。 ③无义突变:突变产生终止密码子,使翻译提前终止，产生不同结构的多肽链。 2.框移突变(缺失,插入)突变点以后的氨基酸排列顺序全部改变,产生不同结构的多肽链 六、1.mRNA：5’-GUAGCCUACCCAUAGG- 3’ 2.①若理解为mRNA的一段序列,则不可产生多肽,因为它无起始密码子。 ②若理解为整条mRNA序列,则根据读码方式的不同,可产生3种多肽。 5’-GUAGCCUACCCAUAGG-3’ 5’-GUAGCCUACCCAUAGG- 3’ 5’-GUAGCCUACCCAUAGG- 3’ 3.位于终止部分，因为含有终止密码子UAG。 七、原核生物在转录时，可在电子显微镜下观察到“羽毛现象”的原因： ①同一DNA模板上可有多个转录同时进行。②RNA链上的小黑点是多聚核糖体，一条RNA链上有多个核糖体。③转录尚未完成，翻译已在进行。 四、原核生物与真核生物在遗传信息的传递、表达及调控中的主要区别。 区别 原核生物 真核生物 复 制 复制起始 一个 多个 复制单位 一个双向复制 多个双向复制 引物 长，多 短，少 DNA聚合酶 DNA-polⅠ,Ⅱ,Ⅲ 三种 DNA-pol Ⅲ在复制延长中起催化作用 ③都有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性 ①DNA-polα，β，γ，δ，ε五种 ②DNA-polδ在复制延长中起催化作用 ③都有5’→3’核酸外切酶活性 末端 无端粒 有端粒复制 转 录 RNA聚合酶 核心酶α2ββ’ 全酶α2ββ’σ 3种， RNA聚合酶Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ 起始 σ亚基辨认起始点 需启动子，RNA聚合酶和转录因子参与 延长 转录延长时，翻译同时进行 转录与翻译不同步 ②延长中，有核小体移位和解聚现象 终止 依赖σ因子和非依赖σ因子 转录终止和加尾修饰同时进行 翻 译 起始因子 IF-1，2，3三种 eIF,十多种 核糖体 70S(30S,50S) 80S(40S,60S) 起始氨基酰 -tRNA fMet- tRNA fMet 即甲酰甲硫氨酰-tRNA Met- tRNAi Met 即甲硫氨酰-tRNA mRNA与小亚基的结合 S-D序列 帽结合蛋白复合物 起始复合物的形成 mRNA先与小亚基结合 再识别 fMet-tRNA fMet mRNA先识别 Met-tRNAi Met 再结合小亚基 E位的有无 有E位 无E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落 调 控 调节蛋白 特异因子，阻遏蛋白，