DGGE操作简介及实例分析.pptVIP

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  • 2017-08-09 发布于广东
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DGGE DGGE操作简介及实例分析 Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE)即变性梯度凝胶电泳,最初是Lerman 等人于20世纪80年代初期发明的,起初主要用来检测DNA片段中的点突变。 Muyzer等人在1993年首次将其应用于微生物群落结构研究。 目前,该技术被广泛用于微生物分子生态学研究的各个领域,目前已经发展成为研究微生物群落结构的主要分子生物学方法之一。 使用对象:长度相同但序列不同的DNA片段 变性剂:尿素和甲酰胺 原理:不同的双链DNA片段因为其序列组成不一样,所以其解链区域及各区域的解链条件变性剂浓度也是不一样的。同样长度但序列不同的DNA片段会在胶中不同位置处达到各自最低解链区域的变性剂浓度,因此它们会在胶中的不同位置处发生部分解链,导致迁移速率大大下降,从而在被区分开来。 DGGE 制胶 成像分析 显色 电泳 点样 DGGE操作流程 DGGE system (D-Code, Bio-Rad) 制胶 点样 电泳 显色 染色剂: 溴化乙啶(EB) 银 SYBR Green SYBR Gold 凝胶成像分析系统 1、分析微生物群落结构组成。 可用于各种微生物生态系统,包括土壤、活性污泥、人体和动物肠道、温泉、植物根系、海洋湖泊、油藏等等。 绝大部分研究通

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