几种提取白木香茎干总RNA方法的比较.pdfVIP

718 生 物 技 术 通 讯 … ． LETTERSIN BIOTECHNOLOGY vol2·3j～lqo-．)5 seepp．·，，Z2O0l1Z2 H doi：10．3969~．issn．1009-0002．2012．05．023 研 究报告 几种提取 白木香茎干总RNA方法的比较 高志晖 ，魏建和 ，熊换英 ，杨云 ，张争 ， 1．中国医学科学院 a．药用植物研 究所 ，北京 100193；b．药用植物研 究所海南分所，海南 万宁 571533； 2．江西中医学院，江西 南昌 330004 [摘要] 目的：通过 比较 多种RNA提取方法 ，确定 白木香茎干RNA提取 的有效手段 ，为 白木香伤害形成沉香药材的 分子研究奠定基础。方法 ：取2年生 白木香茎，分别用CTAB法、TRIzol法、异硫氰酸胍～SDS法、Qiagen试剂盒和Nor． gen试剂盒法提取总RNA，通过琼脂糖凝胶 电泳和紫外分光光度法测定其产量与质量 ，并通过cDNA合成及小样本克 隆测序检查 RNA的可用性。结果：异硫氰酸胍一SDS法及Norgen试剂盒法提 出的RNA条带清晰，完整性好 ；D 。， D： 值可达2．0左右 ，纯度较高，其产量足够应用于cDNA合成；其他方法不能提 出RNA。结论 ：异硫氰酸胍一SDS法 及Norgen试剂盒法可用于 白木香茎干RNA提取 。 [关键词] 濒危南药；白木香 ；RNA提取 ；沉香 ；茎干 [中图分类号] Q943 [文献标识码] A [文章编号] 1009—0002(2012)05—0718-04 Comparison of SeveralM ethods for RNA Extraction from Stems of Aquilaria sinensis GAO Zhi—Hui。 WEIJian—He ，XIONG Huan—Ying ’。，YANG Yun，ZHANG Zheng 1．a．InstituteofMedicinalPlantDevelopment，Beijing100193；b．HainanBranch，InstituteofMedicinalPlant Development，Wanning 571533；Chinese Academy ofMedicalScience；2． JiangxiCollegeofTraditionalChinese Medicine，Nanchang330004；China Correspondingauthor，E—mail：jhwei@implad．ac．cn [Abstract] 0bjective：Aquilariasinensisisoneofthesignificanteconomictreespeciesforproducingagarwood which isin high demand ofrmedicine，incense and perfume acrossAsia，Middle Eastand Europe．As the agar- wood ishigh—priced，thewild resource ofA．sinensiswasseverely destroyed to obtain it．Agarwood isonly formed in wounded ormicrobe infected stems，resuhingin low production efficiency．To pr